注射用雙黃連（凍干）化學(xué)成分和質(zhì)量控制研究.pdf

1、注射用雙黃連（凍干）是由金銀花、連翹、黃芩三味中藥提取物組成的純中藥靜脈用無菌粉針劑。臨床上用于發(fā)熱、微惡風(fēng)寒或不惡寒、咳嗽氣促、咳痰色黃、咽紅腫痛等急性上呼吸道感染、急性支氣管炎、急性扁桃腺炎、輕型肺炎等病癥。本課題以注射用雙黃連（凍干）為研究對象，對其化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，并在此基礎(chǔ)上，以多成分控制為切入點(diǎn)對注射用雙黃連（凍干）質(zhì)量控制方法進(jìn)行了提高與完善，以期能更好地控制、保障注射用雙黃連（凍干）的質(zhì)量。本研究工作主要包含

2、以下幾方面內(nèi)容：
　　1、對注射用雙黃連（凍干）中微量元素進(jìn)行了分析，為多方面闡明注射用雙黃連（凍干）臨床作用機(jī)理提供有價(jià)值的信息。利用電感耦合等離子體質(zhì)譜技術(shù)（ICP-MS）對注射用雙黃連（凍干）中存在的微量金屬元素進(jìn)行了研究，結(jié)果表明注射用雙黃連（凍干）中含有As、B、Ba、Ti、Mn、Pb、Zn、Cd、Co、Cr、Cu、Fe、Ni、V等14種微量元素。所建立的方法準(zhǔn)確、快速、靈敏，適于測定注射用雙黃連（凍干）中微量金屬元素的

3、含量。14種微量元素含量約為注射用雙黃連（凍干）總量的0.0030％。
　　2、以糖及糖醇對照品作對照，利用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對注射用雙黃連（凍干）中的糖及糖醇類成分進(jìn)行定性分析，確定了12種糖及糖醇類成分，包括糖類7個(gè)，即葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖，糖醇類5個(gè)，即肌醇、甘露醇、赤蘚醇、阿拉伯糖醇、山梨糖醇。同時(shí)，利用GC及HPLC-ELSD方法，對測定注射用雙黃連（凍干）中葡萄糖、肌醇、果糖及蔗糖4種糖

4、及糖醇類成分含量的方法進(jìn)行了研究，建立了多指標(biāo)控制注射用雙黃連（凍干）中糖及糖醇類成分的含量測定方法。這四種糖及糖醇含量約為注射用雙黃連（凍干）總量的18%。
　　3、采用氨基酸自動分析技術(shù)，對注射用雙黃連（凍干）中游離和總氨基酸進(jìn)行定性、定量分析。結(jié)果表明注射用雙黃連（凍干）含有門冬氨酸、蘇氨酸等18種氨基酸，其中含有人體必需的6種氨基酸，游離氨基酸的含量為注射用雙黃連（凍干）總量的0.41%，總氨基酸為注射用雙黃連（凍干）總量

5、的1.30%，提示注射用雙黃連（凍干）中的氨基酸可能以肽的形式存在。通過對注射用雙黃連（凍干）中氨基酸成分進(jìn)行分析，為多方面闡明注射用雙黃連（凍干）臨床作用機(jī)理提供了有價(jià)值的信息。
　　4、注射用雙黃連（凍干）由金銀花、連翹、黃芩三味中藥組成。這三味藥材均有黃酮類成分的報(bào)道，為此測定注射用雙黃連（凍干）中的總黃酮以進(jìn)一步控制注射用雙黃連（凍干）的質(zhì)量。采用差示分光光度法測定注射用雙黃連（凍干）中總黃酮的含量，利用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化了總黃

6、酮的提取參數(shù)，并對該方法進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，該方法準(zhǔn)確、可靠，可用于注射用雙黃連（凍干）總黃酮的質(zhì)量控制。6批注射用雙黃連（凍干）中總黃酮的含量平均為30.36%。
　　5、組成注射用雙黃連（凍干）的三味藥——金銀花、黃芩、連翹的化學(xué)成分研究較為透徹，而注射用雙黃連（凍干）的化學(xué)成分研究相對較少。經(jīng)對其氯仿萃取部位，乙酸乙酯萃取部位，正丁醇萃取部位及水萃取部位進(jìn)行液相質(zhì)譜聯(lián)用分析，通過LC-MS提供的保留時(shí)間信息、紫外吸收信息及分子

7、量信息，與組成注射用雙黃連（凍干）的三味藥——金銀花、黃芩、連翹的相應(yīng)萃取部位比對，分析了注射用雙黃連（凍干）各萃取部位化學(xué)成分的分子量、紫外吸收及藥味來源。通過LC-MSn提供的多級碎片信息，與已知對照品或三味藥材中分離的已知成分比對，并查閱相關(guān)文獻(xiàn)，初步確定了12種化學(xué)成分和14種可能的化學(xué)成分，包括七種木脂素類，九種黃酮類，兩種苯乙醇苷類，六種奎寧酸衍生物類和兩種其它成分。其中16種物質(zhì)均為在注射用雙黃連（凍干）中首次報(bào)道。

8、>　　6．在物質(zhì)基礎(chǔ)研究的基礎(chǔ)上，對現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢查項(xiàng)和鑒別項(xiàng)進(jìn)行了增訂或修訂，采用多成分含量測定方法對注射用雙黃連（凍干）中主要成分（糖及黃酮類）進(jìn)行控制，進(jìn)一步提高與完善了注射用雙黃連（凍干）的質(zhì)量控制方法。
　　綜上，利用現(xiàn)代分離分析技術(shù)對注射用雙黃連（凍干）中糖及糖醇類成分、氨基酸類成分、微量元素及總黃酮進(jìn)行了定性和定量分析，獲知了其中約70％的物質(zhì)基礎(chǔ)。利用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對注射用雙黃連（凍干）化學(xué)成分的定性研究，初步確定