蜂膠對感染根管消毒功效的實(shí)驗(yàn)和臨床研究.pdf

1、背景：牙齒根尖周炎是由根管內(nèi)微生物感染引起的。微生物因素在根尖周炎的發(fā)生、發(fā)展和持續(xù)存在中起著非常重要的作用。厭氧菌已被大多數(shù)學(xué)者公認(rèn)為是牙髓、根尖周病的優(yōu)勢菌，約占其細(xì)菌總數(shù)的2/3以上。臨床治療中針對感染根管最常用的消毒方法是藥物消毒。目前常用的根管消毒藥物有甲醛甲酚(formcresol，F(xiàn)C)、樟腦苯酚(camphorated phenol，CP)和氫氧化鈣(Ca(OH)2)等。近年來，國內(nèi)外研究表明，F(xiàn)C、CP等都有較強(qiáng)的細(xì)胞

2、毒性，作為半抗原可引起機(jī)體免疫損害，同時FC有較強(qiáng)的刺激性和致癌的可能性；氫氧化鈣不能有效消除感染根管內(nèi)的所有微生物，尤其對頑固性根尖周炎或根管治療術(shù)失敗后患牙中的病原菌。因此尋求一種消毒力強(qiáng)、副作用小的根管消毒藥物一直是國內(nèi)外學(xué)者所關(guān)注的研究課題。 近年來蜂膠用于口腔疾病的治療已有相關(guān)報道。據(jù)文獻(xiàn)報道蜂膠使用安全，對人體無毒、無刺激性、無致癌性，不產(chǎn)生耐藥性等。盡管國內(nèi)外學(xué)者對蜂膠做了大量研究，但是目前關(guān)于國產(chǎn)蜂膠用于根管消毒

3、方面的基礎(chǔ)及臨床等相關(guān)研究報道還較少，所以本課題將對這些方向進(jìn)行些研究。目的：本課題擬研究國產(chǎn)水溶性蜂膠對感染根管內(nèi)常見菌：中間普氏菌、具核梭桿菌、中間普氏菌及具核梭桿菌的混合菌的抑菌活性；對人牙周膜成纖維細(xì)胞的細(xì)胞毒性。探討蜂膠用于感染根管消毒的有效性和安全性，同時選擇適宜濃度的蜂膠進(jìn)行臨床試驗(yàn)，獲取臨床療效資料，為臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。 材料與方法： 1.蜂膠對中間普氏菌、具核梭桿菌、中間普氏菌及具核梭桿菌的混

4、合菌的體外抑菌實(shí)驗(yàn)。用BHI+Hemin液體培養(yǎng)基將蜂膠水溶液按對倍稀釋原理，配成5種濃度的藥液，依次加入BHI培養(yǎng)基中，制備成含藥物瓊脂平板，在厭氧條件下接種并培養(yǎng)中間普氏菌、具核梭桿菌及二者的混合菌48小時，檢測瓊脂平板上細(xì)菌的生長情況，無細(xì)菌生長的最低藥物濃度為蜂膠對兩單種菌及混合菌的最低殺菌濃度(MBC)。 2.蜂膠對人牙周膜成纖維細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法，以氫氧化鈣為對照組，評價0.6％、0.

5、4％、0.2％、0.1％的蜂膠水溶液對人牙周膜成纖維細(xì)胞相對增殖率的影響，并用五級毒性分類法評級。 3.采用完全隨機(jī)對照的方法，選擇慢性根尖周炎門診患者72名，隨機(jī)分為三組(兩組為實(shí)驗(yàn)組，一組為對照組)。選擇單根管前牙或雙尖牙，常規(guī)根管預(yù)備后，實(shí)驗(yàn)組分別封入0.1％的蜂膠和0.4％的蜂膠，對照組封入氫氧化鈣糊劑， 1周后復(fù)查。分別記錄三組病例臨床癥狀的改善情況及復(fù)診次數(shù)；分別在根管預(yù)備前、根管預(yù)備后、封藥后用紙尖取樣并接種在BH

6、I血瓊脂培養(yǎng)基表面，厭氧罐培養(yǎng)48 h。觀察培養(yǎng)基上細(xì)菌菌落的形態(tài)，選擇培養(yǎng)基上的優(yōu)勢菌，依據(jù)Bergey’S細(xì)菌學(xué)鑒定手冊，作革蘭氏染色進(jìn)行初步鑒定分類，并記錄相應(yīng)菌落數(shù)量。通過所得數(shù)據(jù)評價蜂膠用于感染根管消毒的臨床效果。 結(jié)果： 1.蜂膠水溶液對中間普氏菌、具核梭桿菌及二者的混合菌均有良好的抑菌作用，其MBC分別為0.025％、0.05％和 0.05％，抑制作用隨蜂膠濃度的升高而增強(qiáng)。 2.在不同濃度的蜂膠及

7、氫氧化鈣溶液的作用下，細(xì)胞相對增殖率均有改變，且濃度越高，細(xì)胞毒性越大，但其細(xì)胞毒性均在2級以下，屬于輕微毒性。其中0.1％的蜂膠與1％的氫氧化鈣細(xì)胞毒性最弱，與其他各濃度組間存在顯著性差異(P＜0.05)。 3.0.1％蜂膠、0.4％蜂膠、氫氧化鈣糊劑均能夠有效改善根尖周炎患者臨床癥狀，從疼痛、叩痛、紅腫、竇道等的消除和緩解方面統(tǒng)計(jì)，單因素各組組間有顯著性差異(P＜0.05)；組間兩兩比較無顯著性差異(P＞0.05)。從封藥次

8、數(shù)上統(tǒng)計(jì)，0.4％蜂膠的改善效果好于其它兩組，兩組實(shí)驗(yàn)組之間有顯著性差異(P＜0.05)，0.4％蜂膠和對照組之間有顯著性差異(P＜0.05)，0.1％蜂膠和對照組之間無顯著性差異(P＞0.05)。細(xì)菌取樣培養(yǎng)結(jié)果顯示0.1％蜂膠、0.4％蜂膠、氫氧化鈣各組在根管預(yù)備前后及封藥后根管內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量均有明顯下降，對各組分別進(jìn)行組間方差分析，組間差異均有顯著性(P＜0.05)，組間兩兩比較沒有顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論：

9、 1.蜂膠水溶液對中間普氏菌、具核梭桿菌及二者的混合菌均有良好的抑菌作用，提示蜂膠對口腔厭氧菌良好的抑菌活性。 2.蜂膠與氫氧化鈣均對人牙周膜成纖維細(xì)胞的毒性較小，其中0.1％的蜂膠與1％的氫氧化鈣的毒性最弱。 3.0.1％蜂膠、0.4％蜂膠和氫氧化鈣糊劑均能夠有效改善根尖周炎患者的臨床癥狀；通過細(xì)菌培養(yǎng)、涂片鏡檢顯示能有效殺滅感染根管內(nèi)的致病菌。統(tǒng)計(jì)結(jié)果提示使用0.4％蜂膠用于根管消毒，具有較好的臨床療效及可操作性。