VEGF單克隆抗體對(duì)大鼠胰腺缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)損傷是臨床一種常見(jiàn)的病理生理過(guò)程。胰腺是對(duì)缺血損傷最為敏感的組織之一,因此胰腺也是最易出現(xiàn)I/R損傷的器官。本研究旨在探討VEGF單克隆抗體(VEGFMCAb)對(duì)胰腺缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　 方法：采用血管夾阻斷大鼠腹腔干和腸系膜上動(dòng)脈法制備胰腺缺血-再灌注模型,實(shí)驗(yàn)對(duì)象為健康雄性SD大鼠70只,隨機(jī)分為A組(手術(shù)對(duì)照組,10只),B組(缺血

2、再灌注組,30只),C組(VEGF單克隆抗體干預(yù)組,30只),B組和C組按缺血時(shí)間再分成15min、30min、60min三個(gè)時(shí)間點(diǎn)組,每組10只。B、C組建立胰腺缺血再灌注模型,C組于缺血前5分鐘尾靜脈注射VEGFMCAb100μg/300g；B組于缺血前5分鐘注射等量生理鹽水；A組作麻醉、開(kāi)腹、不阻斷血流。應(yīng)用ELASA法檢測(cè)VEGF、TNF-α表達(dá),并應(yīng)用凋亡原位標(biāo)記檢測(cè)(TUNEL)胰腺細(xì)胞凋亡,RT-PCR,Western B

3、lot和免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)胰腺組織中Fas,FasL mRNA和蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：B組血清中的TNF-α、VEGF表達(dá)明顯高于C組(p<0.01)。B組胰腺組織中TUNEL染色見(jiàn)典型的細(xì)胞核固縮及凋亡小體形成。應(yīng)用VEGF單克隆抗體后,胰腺組織中胰腺細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯下降(p<0.01)。和B組相比,胰腺組織中Fas、FasL mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯降低,免疫組化亦顯示Fas,FasL在VEGF單克隆抗體組中顯