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1、目的:對(duì)花生衣的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行初步研究;以總黃酮含量為指標(biāo)對(duì)龍花方中仙鶴草、花生衣的提取工藝進(jìn)行考察,優(yōu)選提取工藝條件;以總黃酮含量為指標(biāo),對(duì)仙鶴草、花生衣中總黃酮進(jìn)行純化,優(yōu)選純化工藝條件;對(duì)提純后的兩種總黃酮進(jìn)行組分配伍進(jìn)而進(jìn)行不同配比的藥效學(xué)比較研究,在此基礎(chǔ)上為該復(fù)方后續(xù)物質(zhì)基礎(chǔ)的研究及制劑開(kāi)發(fā)提供系統(tǒng)、全面的數(shù)據(jù)及理論支撐。
方法:按《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄IX H中水分測(cè)定法中的第一法,附錄IX K灰分測(cè)定法
2、和酸不溶性灰分測(cè)定法和附錄X A浸出物測(cè)定法測(cè)定。采用單因素篩選結(jié)合響應(yīng)面設(shè)計(jì)法試驗(yàn),對(duì)影響總黃酮含量的提取次數(shù)、乙醇濃度、液料比與提取時(shí)間對(duì)龍花方中的仙鶴草與花生衣的提取工藝進(jìn)行考察,確定出最佳的工藝參數(shù);以總黃酮的吸附率和解吸率為指標(biāo),考察仙鶴草和花生衣中總黃酮的樹(shù)脂的吸附及洗脫條件。腹腔注射環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠造成血小板減少模型,采用針對(duì)小復(fù)方的基線等比設(shè)計(jì)法擬定兩種總黃酮的配比處方。觀察不同處方對(duì)模型小鼠外周血小板、紅細(xì)胞、血紅蛋白,
3、臟器指數(shù)的影響。
結(jié)果:花生衣中水分不得超過(guò)9.6%,灰分不得超過(guò)2.5%,酸不溶性灰分不得超過(guò)0.27%,水浸出物不得超過(guò)11.9%,醇浸出物不得超過(guò)25.7%,薄層色譜法可用于鑒別花生衣,高效液相色譜法測(cè)定的兒茶素含量穩(wěn)定。仙鶴草的最佳提取工藝為:提取溶劑為50%乙醇,液料比為20倍,提取時(shí)間為70min,提取3次,在提取工藝下,仙鶴草總黃酮平均提取率為9.5%?;ㄉ碌淖罴烟崛」に嚍?提取溶劑為40%乙醇,液料比為15倍
4、,提取時(shí)間為30min,提取3次。在此提取工藝下,花生衣總黃酮的平均提取率為27.21%。D-101型大孔樹(shù)脂對(duì)仙鶴草和花生衣中總黃酮有較好的分離純化作用。仙鶴草的最佳純化工藝為徑高比為1:10,上樣藥液濃度為0.15g·mL-1,上樣藥液流速為1BV/h,水洗4BV,洗脫溶劑為50%的乙醇,醇洗3BV,純化后總黃酮純度比純化前提高了30%左右?;ㄉ碌淖罴鸭兓に嚍閺礁弑葹?:15,上樣藥液濃度為0.1g·mL-1,上樣藥液流速為2B
5、V/h,水洗3BV,洗脫溶劑為70%的乙醇,醇洗3BV,純化后總黃酮純度比純化前提高了30%左右。5個(gè)處方均能提高造模小鼠的血小板數(shù),處方4作用較為明顯(P<0.01),對(duì)白細(xì)胞數(shù),紅細(xì)胞數(shù)、胸腺指數(shù)脾臟指數(shù)及體重變化值也有一定的升高趨勢(shì)。
結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)初步對(duì)花生衣的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究,為以后花生衣資源的合理利用奠定了基礎(chǔ);龍花方中的仙鶴草、花生衣中總黃酮的提取分離純化工藝穩(wěn)定,可行;優(yōu)選出的處方能顯著的提高造膜小鼠的血小板數(shù)
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