YAP蛋白在肝細(xì)胞癌表達(dá)的臨床意義及其與肝星狀細(xì)胞的關(guān)系.pdf

1、研究背景:
　　原發(fā)性肝癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，其中約90％為肝細(xì)胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)，其全球發(fā)病率居第五位，是我國第二位癌癥殺手，也是全球第三位的癌癥死因。由于肝癌惡性程度較高、病情進(jìn)展快，大部分患者(＞80％)就診時(shí)已屬晚期，不適合手術(shù)切除。即便可以手術(shù)切除的肝癌，2年復(fù)發(fā)率也高達(dá)50％。降低肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是進(jìn)一步提高肝癌治療療效的熱點(diǎn)與難點(diǎn)之一。
　　Hippo通路最

2、初在果蠅細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)，是一條高度保守的調(diào)控組織大小的抑制性信號通路。人Hippo通路包括:Mst1/2、WW45、Lats，Mob1。Hippo通路通過抑制Cyclin E，DIAP1（Drosophila inhibitor of apoptosis protein1，果蠅凋亡抑制蛋白1）及bantam等的表達(dá)參與調(diào)控細(xì)胞增殖與凋亡調(diào)節(jié)信號。YAP(Yesassociated protein)則是銜接Hippo通路及其下游生理效應(yīng)的主要

3、蛋白分子，若Hippo通路的失活導(dǎo)致YAP蛋白高表達(dá)可以使組織表現(xiàn)為細(xì)胞倍增時(shí)間及細(xì)胞周期縮短，細(xì)胞數(shù)目增多，增殖過度和凋亡不足。研究表明，YAP在調(diào)控細(xì)胞增殖與凋亡、控制器官大小、細(xì)胞接觸性抑制乃至腫瘤的發(fā)生過程中有重要的作用。YAP作為新近發(fā)現(xiàn)的癌基因在幾種實(shí)體腫瘤中出現(xiàn)異常高表達(dá)，在肝癌中也已有報(bào)道，YAP的高表達(dá)是影響HCC患者預(yù)后的獨(dú)立因素。另有研究顯示，人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞中Mst1的過表達(dá)可以導(dǎo)致YAP的磷酸化增加及

4、其下游蛋白結(jié)締組織生長因子(Connective tissue growth factor, CTGF)的表達(dá)減少，而CTGF作為調(diào)節(jié)激活肝星狀細(xì)胞(Hepatic stellate cells，HSC)生物學(xué)功能的重要細(xì)胞因子也早已被大家所熟知。
　　大多數(shù)HCC患者都有慢性肝病的背景，而肝硬化是發(fā)展為HCC的主要危險(xiǎn)因素。HSC的激活已被公認(rèn)為是肝纖維化乃至最后發(fā)展至肝硬化的重要環(huán)節(jié)。目前研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性肝癌組織中變形的肝血竇

5、癌細(xì)胞之間HSC數(shù)量明顯增多，肝癌包膜下及壞死灶周邊也可見較多的HSC，且HSC對于HCC的增殖，存活及侵襲均有明顯的促進(jìn)作用，其生物學(xué)效應(yīng)的產(chǎn)生可能與誘導(dǎo)細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶ERK與NFkappaB的激活有關(guān)，其它HSC分泌的各種細(xì)胞因子諸如腫瘤生長因子(TGF-beta)、成纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子、胰島素樣生長因子和其它尚未認(rèn)識(shí)的因子都可能參與其中，HSC的促腫瘤生長與侵襲的生物學(xué)效應(yīng)還與層粘連蛋白-5(Ln-5)的表達(dá)，E

6、CM的重塑等都有關(guān)。但是目前仍未有對YAP蛋白的表達(dá)與激活HSC之間關(guān)系的報(bào)道。
　　目的:
　　1.評價(jià)癌組織中YAP的表達(dá)對肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)及預(yù)后的影響。
　　2.初探Y(jié)AP在肝癌組織的表達(dá)與HSC的潛在關(guān)系。
　　材料與方法:
　　借助組織芯片技術(shù)回顧性分析227例肝癌組織標(biāo)本。應(yīng)用免疫組化的方法觀察227例YAP及102例患者激活HSC在肝癌及對應(yīng)的癌旁肝組織中的表達(dá)。利用卡方分析及生存函數(shù)評價(jià)癌組織中

7、YAP的表達(dá)對肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)及預(yù)后的影響并分析YAP表達(dá)與HSC數(shù)目兩者之間的可能潛在聯(lián)系。
　　結(jié)果:
　　1.YAP在癌組織內(nèi)較之癌旁肝組織高表達(dá)，且多表達(dá)于胞核，癌旁則多表達(dá)于胞質(zhì)。
　　2.癌組織內(nèi)YAP的表達(dá)與肝硬化、AFP水平、患者腫瘤大小、腫瘤包膜、血管侵犯、分化程度及TNM分期相關(guān)，而與性別、年齡、乙肝病毒表面抗原HbsAg及腫瘤數(shù)目均無明顯相關(guān)性
　　3.癌組織YAP的高表達(dá)是影響HCC患者術(shù)后復(fù)

8、發(fā)與總體生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　4.YAP在癌組織及癌旁肝組織內(nèi)的表達(dá)與癌旁激活HSC數(shù)目均具有一定的相關(guān)性，其可能聯(lián)系為:癌組織中高表達(dá)的YAP使得肝癌細(xì)胞分泌更多的CTGF，繼而作用于癌旁的HSC，激活并調(diào)節(jié)其功能，促進(jìn)ECM的分泌。肝癌細(xì)胞胞漿中的YAP/TAZ感受到細(xì)胞微環(huán)境中ECM增多導(dǎo)致的硬度升高而活性增強(qiáng)并轉(zhuǎn)錄入核，進(jìn)而導(dǎo)致更多CTGF的產(chǎn)生，形成一個(gè)“放大回路”。
　　結(jié)論:
　　1.YAP在癌組織內(nèi)