Dendritoma治療小鼠移植性腦膠質(zhì)瘤的實驗研究.pdf

1、目的： 研究樹突狀細(xì)胞融合瘤苗對裸鼠腦膠質(zhì)瘤的治療機制及治療效應(yīng)。 方法： 從人外周血中提取樹突狀細(xì)胞的前體即單核細(xì)胞，利用粒/巨噬細(xì)胞集落刺激因子(CSF)、白細(xì)胞介素4(IL-4)對單核細(xì)胞進行體外誘導(dǎo)，使其成為成熟的樹突狀細(xì)胞(DC)。常規(guī)體外培養(yǎng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞，將一定比例的樹突狀細(xì)胞與膠質(zhì)瘤細(xì)胞融合后制成Dendritoma。將一定數(shù)量的膠質(zhì)瘤細(xì)胞經(jīng)立體定向技術(shù)注入裸鼠腦右側(cè)尾狀核區(qū)域，制成動物荷瘤模型。分別

2、將等量、等體積的融合細(xì)胞疫苗(Dendritoma)、DC、生理鹽水經(jīng)腹腔途徑注入荷瘤裸鼠體內(nèi)。將處死組裸鼠于實驗干預(yù)兩周后全部處死，觀察并記錄裸鼠腫瘤組織最大切面上壞死面積所占比例；記數(shù)腫瘤組織中淋巴細(xì)胞(CD8+T細(xì)胞)浸潤情況，將三組結(jié)果進行對比分析；自然死亡組裸鼠于實驗干預(yù)后待其自然死亡，記錄三組裸鼠存活時間長短并進行比較。通過上述方法對融合細(xì)胞疫苗的治療效應(yīng)和治療機制進行研究和討論。 結(jié)果: 外周血來源的單核細(xì)

3、胞在經(jīng)粒/巨噬細(xì)胞集落刺激因子(CSF)、白細(xì)胞介素4(IL-4)體外誘導(dǎo)4-6天后，顯微鏡下可見單核細(xì)胞體積普遍增大、呈類圓形，少量細(xì)胞表面出現(xiàn)細(xì)刺樣突起；誘導(dǎo)8-10天后，細(xì)胞表面突起增多，形狀漸不規(guī)則，呈多形性；誘導(dǎo)10-12天后，大部分細(xì)胞脫壁懸浮生長，細(xì)胞表面多見樹枝狀突起。裸鼠在荷瘤后平均15天左右出現(xiàn)外觀蒼老、體重減輕、步態(tài)不穩(wěn)等臨床表現(xiàn)；接受融合疫苗(Dendritoma)治療組裸鼠腫瘤組織最大切面上壞死區(qū)面積所占比例顯