血小板衍生生長(zhǎng)因子及其受體在IgA腎病腎間質(zhì)纖維化患者腎組織及血液中的表達(dá)研究.pdf

1、目的:通過檢測(cè)不同程度腎間質(zhì)纖維化患者腎組織及血、尿中PDGF-BB、TGF-β、α-SMA等指標(biāo),探討PDGF-BB促腎間質(zhì)纖維化的機(jī)制和意義;尋找方便臨床檢測(cè)的監(jiān)測(cè)腎間質(zhì)纖維化的指標(biāo);尋找防治腎間質(zhì)纖維化的新途徑。
　　 方法:
　　 1.通過腎活檢收集20例IgA腎病患者的腎組織病理標(biāo)本及其相對(duì)應(yīng)的血、尿標(biāo)本。入組病例選擇:納入標(biāo)準(zhǔn):IgA腎病患者。排除標(biāo)準(zhǔn):1、伴有急性腎功能衰竭者;2、有慢性肝炎或肝硬化病史;3

2、、有腫瘤病史;4、紫癜性腎炎等繼發(fā)性IgA腎病。
　　 2.腎組織行HE、PAS、Masson染色,光鏡下觀察其病理改變,根據(jù)Banff分級(jí),將不同程度腎間質(zhì)纖維化的腎組織標(biāo)本分為四組(每組5例):對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組(輕、中、重)。并行免疫熒光、電鏡檢查。(分組方法:根據(jù)Banff分級(jí)將Masson染色光鏡下腎小管萎縮及間質(zhì)纖維化病變程度半定量分為4級(jí)。0級(jí):腎小管及腎間質(zhì)正常(對(duì)照組);1級(jí):病變范圍＜25％(輕);2級(jí):病變范圍

3、26％-50％(中);3級(jí):病變范圍＞50％(重)。)
　　 3.腎組織免疫組化染色:采用SABC法檢測(cè)PDGF-BB、PDGFR-β、TGF-β及α-SMA的表達(dá),用Image-Pro Plus6.0病理圖像分析軟件測(cè)定計(jì)算各觀測(cè)指標(biāo)的平均光密度。
　　 4.采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)相對(duì)應(yīng)患者的血清和尿液的PDGF-BB及RBP等指標(biāo),雞氨酸氧化酶法檢測(cè)血清肌酐水平,生化比色法檢測(cè)患者的尿NAG酶,并進(jìn)行分析。
　

4、　 5.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行計(jì)算分析得出結(jié)論。兩組間比較使用H檢驗(yàn)。各觀測(cè)指標(biāo)間作spearman秩相關(guān)性分析。P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.腎組織免疫組化結(jié)果:(1)PDGF-BB及PDGFR-β可見在腎小管上皮細(xì)胞胞漿呈陽性表達(dá),腎間質(zhì)區(qū)僅少量表達(dá),PDGF-BB及PDGFR-β的表達(dá)強(qiáng)度隨著腎間質(zhì)纖維化嚴(yán)重程度的增加而增高,在腎間質(zhì)纖維化腎組織中PDGF-BB及PDG

5、FR-β的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)。Α-SMA可見在腎小管上皮細(xì)胞胞漿、腎間質(zhì)細(xì)胞胞漿及血管壁有陽性表達(dá)。且其表達(dá)強(qiáng)度與腎間質(zhì)纖維化程度呈正相關(guān),在腎間質(zhì)纖維化組織中α-SMA的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)。TGF-β可見在近曲小管上皮細(xì)胞胞漿及胞膜陽性表達(dá)。且其表達(dá)強(qiáng)度與腎間質(zhì)纖維化程度呈正相關(guān),在腎間質(zhì)纖維化組織中TGF-β的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。(2)隨著α-SMA平均光密度的增高,PDGF-BB的平

6、均光密度亦上升,兩者的表達(dá)呈正相關(guān)(P＜0.01,spearman相關(guān)系數(shù)為0.998)。隨著α-SMA平均光密度的增高,PDGFR-β的平均光密度亦上升,兩者的表達(dá)呈正相關(guān)。PDGF-BB及PDGFR-β的平均光密度隨著TGF-β平均光密度的增高亦而增高,PDGF-BB與TGF-β兩者的表達(dá)呈正相關(guān),PDGFR-β與TGF-β兩者的表達(dá)呈正相關(guān)。PDGF-BB及PDGFR-β的表達(dá)呈正相關(guān)。
　　 2.1對(duì)照組血PDGF-BB

7、的濃度是182.25±24.90pg/ml,實(shí)驗(yàn)組血PDGF-BB的水平分別是是271.51±27.38pg/ml、330.34±35.27 pg/ml、499.52±73.00pg/ml,實(shí)驗(yàn)組各組的患者血清PDGF-BB水平顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);實(shí)驗(yàn)組中隨著腎間質(zhì)纖維化程度加重而表現(xiàn)患者血清PDGF-BB水平增高,兩者關(guān)系呈正相關(guān)。
　　 2.2對(duì)照組患者尿PDGF-BB的濃度是1924.2±577.30pg/ml

8、。實(shí)驗(yàn)組尿PDGF-BB的水平分別是是3643.2±865.99pg/ml,5301.0±462.03pg/ml,7157.0±1433.99pg/ml。實(shí)驗(yàn)組各組的患者尿液PDGF-BB水平顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);實(shí)驗(yàn)組中隨著腎間質(zhì)纖維化程度加重而表現(xiàn)患者尿液PDGF-BB水平增高,兩者關(guān)系呈正相關(guān)。
　　 2.3所觀察病例的腎組織PDGF-BB表達(dá)與血PDGF-BB水平呈正相關(guān),與尿PDGF-BB水平呈正相關(guān)。腎組織

9、PDGFR-β表達(dá)與血PDGF-BB水平呈正相關(guān),與尿PDGF-BB水平呈正相關(guān)。
　　 3.腎組織PDGFR-β的表達(dá)與尿RBP水平兩者呈正相關(guān);PDGFR-β的表達(dá)與尿NAG酶水平兩者無相關(guān)性;PDGFR-β的表達(dá)與血肌酐水平兩者呈正相關(guān)。腎組織PDGF-BB的表達(dá)與尿RBP水平兩者呈正相關(guān);PDGF-BB的表達(dá)與尿NAG酶水平兩者無相關(guān)性;PDGF-BB的表達(dá)與血肌酐水平兩者呈正相關(guān)。
　　 結(jié)論:
　　

10、1.在腎纖維化腎組織中,PDGF-BB、PDGFR-β、TGF-β和α-SMA在腎小管表達(dá)顯著增加,并隨著纖維化程度加重而表達(dá)增加,提示PDGF-BB、TGF-β和α-SMA是腎小管間質(zhì)纖維化的重要致病因子,多種因子同時(shí)表達(dá)增加,提示存在多種因子相互間的網(wǎng)絡(luò)作用。
　　 2.腎組織PDGF-BB和PDGFR-β的表達(dá)與血、尿PDGF-BB水平正相關(guān),提示血、尿PDGF-BB變化可反映腎間質(zhì)纖維化的嚴(yán)重程度,血、尿PDGF-BB測(cè)