中醫(yī)大腸濕熱證模型研制及葛根芩連湯對其影響的研究.pdf

1、目的：研究大腸濕熱證動物模型的造模方法，檢測大腸濕熱證模型鼠血清白介素(Interleukin，IL)-1，-2，-6含量的變化及血清和糞便的輪狀病毒抗原，光、電鏡觀察模型鼠大腸組織病理變化及超微結(jié)構(gòu)改變，應(yīng)用清熱祛濕方藥葛根芩連湯反佐治療，探討大腸濕熱證模型的部分客觀化指標。 方法：以清潔級Wistar大鼠及BLAB/C幼鼠為實驗動物，設(shè)立大腸桿菌模型組(Ⅰ組)、輪狀病毒模型組(Ⅱ組)、大腸桿菌+輪狀病毒模型組(Ⅲ組)、幼鼠輪

2、狀病毒模型組(Ⅳ組)、正常對照組、葛根芩連湯治療組(治療Ⅰ組、Ⅲ組和Ⅴ組)、治療對照組(Ⅱ組、Ⅳ組和Ⅵ組)，葛根芩連湯治療組和治療對照組生物因素編排分別對應(yīng)模型組的Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組。應(yīng)用高糖高脂飼料、高溫高濕環(huán)境、輪狀病毒及產(chǎn)毒性大腸桿菌灌胃，綜合制作大腸濕熱證動物模型，給予清熱祛濕方藥葛根芩連湯反佐驗證治療，應(yīng)用放射免疫法檢測鼠血清IL-1、IL-2、IL-6含量，ELISA法檢測血及糞便中的輪狀病毒抗原，HE染色法觀察結(jié)腸、回腸病理

3、改變，透射電鏡觀察超微病理變化。 結(jié)果：大腸濕熱證模型鼠出現(xiàn)發(fā)熱、食欲不振、肛門紅腫充血、便溏、嗜臥、行動呆滯、毛發(fā)蓬松、飲水少等，該模型無論從發(fā)病條件、病變部位，還是主要癥狀、體征等均近似于中醫(yī)大腸濕熱證型。各造模方法中模型鼠血清IL-1、IL-2含量比正常對照組顯著升高(P<0.001)，而IL-6組間無顯著性差別(P=0．053)，EuSA法可檢測到血清及糞便中的輪狀病毒抗原，結(jié)腸、回腸組織HE染色見黏膜充血、水腫、滲出、

4、淋巴組織增生、大量炎癥細胞浸潤；電鏡下可見大量桿菌吞噬體及病毒包涵體。葛根芩連湯治療鼠癥狀消失，血清IL-1、IL-2、IL-6含量接近正常，血清及糞便中的輪狀病毒抗原轉(zhuǎn)陰，光、電鏡顯示腸道炎癥反應(yīng)明顯減輕。 結(jié)論：(1)在高糖高脂飼料喂養(yǎng)、輪狀病毒及大腸桿菌灌胃的基礎(chǔ)上，我們首次采用全封閉式高溫倉，自動調(diào)節(jié)溫度、濕度，成功研制了大腸濕熱證動物模型，體現(xiàn)了中醫(yī)大腸濕熱證脾胃內(nèi)傷，再感客邪的“內(nèi)外合邪”致病特點； (2

5、)大腸濕熱證模型鼠血清IL-1、IL-2含量明顯升高(與正常對照組比較P<0.001)，而血清IL-6升高不顯著(P>0.05)，表明大腸濕熱證模型鼠出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，結(jié)腸、回腸的光、電鏡檢查結(jié)果證實模型鼠結(jié)腸、回腸出現(xiàn)廣泛的炎癥反應(yīng)； (3)運用葛根芩連湯對模型大鼠進行反佐驗證治療后大腸濕熱證癥狀消失，血清IL-1、IL-2、IL-6含量恢復(fù)正常，血及糞便中輪狀病毒抗原轉(zhuǎn)陰，光、電鏡觀察腸道炎癥改變明顯減輕甚至消失，也證明了模型為