雌激素及其受體調(diào)控人卵母細(xì)胞發(fā)育的機(jī)制研究.pdf

1、本研究首先探討卵泡液內(nèi)FSH、LH、DHEA、TESTO與卵子成熟的關(guān)系。選取因不孕來我院進(jìn)行ICSI治療的女性患者187人,收集取卵日外周血,取卵時(shí)共收集164個(gè)不同大小卵泡內(nèi)的卵泡液(卵泡大小按≤12mm,13mm-15mm,16mm-19mm,≥20mm來分組,卵子成熟度分為GV、MI、MII、退化組)并分離出卵丘細(xì)胞,測(cè)定卵泡液中FSH、LH、DHEA、TESTO的水平。研究結(jié)果顯示:卵泡液內(nèi)FSH、LH、DHEA、TESTO濃

2、度與卵泡大小無關(guān);卵子成熟度受卵泡液內(nèi)LH、TESTO水平的影響。
　　其次,我們對(duì)促排卵患者外周血和卵泡液中E2及ER-β與卵母細(xì)胞成熟的關(guān)系進(jìn)行了研究。ELISA法檢測(cè)患者取卵當(dāng)日血清及卵泡液中E2濃度,Real-time PCR檢測(cè)卵丘細(xì)胞內(nèi)ER-β mRNA的表達(dá)水平,結(jié)果顯示外周血中E2水平能間接反映卵泡液內(nèi)的E2水平,而卵母細(xì)胞成熟度與卵泡液內(nèi)E2水平和卵丘細(xì)胞ER-β表達(dá)量正相關(guān)。
　　雌二醇需通過雌激素受體E

3、Rα,ERβ和非基因型GPER來發(fā)揮效應(yīng)。在一些動(dòng)物雌激素受體基因敲除模型中證實(shí)這些雌激素受體在卵母細(xì)胞生長發(fā)育和排卵過程中有重要作用。我們應(yīng)用腹腔鏡技術(shù)獲取PCOS患者和正常育齡婦女的部分卵巢組織,測(cè)定GPER在顆粒細(xì)胞中的表達(dá)。應(yīng)用PCOS患者和正常女性行ICSI治療過程中獲取的顆粒細(xì)胞,檢測(cè)GPER在發(fā)育不同階段的卵母細(xì)胞顆粒細(xì)胞中的表達(dá)情況,探索GPER表達(dá)與卵母細(xì)胞成熟的關(guān)系。我們采用Real-time RT-PCR和West