白蘿卜粗提物作用于Cajal間質(zhì)細(xì)胞促胃腸動(dòng)力作用的機(jī)制.pdf

1、白蘿卜（Raphanussativus L.）又稱萊菔，是中草藥中具有明確促胃腸動(dòng)力的單味中藥，被廣泛用于“食積脹滿”、“反胃吐食”的治療。白蘿卜作為藥源性食物已經(jīng)應(yīng)用久遠(yuǎn)，但是在其促進(jìn)胃腸動(dòng)力方面機(jī)制的研究不夠完善。白蘿卜本身是可食用并無明顯毒副作用的中藥，如果能夠闡述清楚其作用機(jī)制，進(jìn)而從中提取到可以用于臨床且作用效果明確的促胃腸動(dòng)力有效成分，則不僅可以回避促胃腸動(dòng)力西藥的毒副作用，而且還具有重要的臨床實(shí)用價(jià)值和巨大的社會、經(jīng)濟(jì)學(xué)效

2、益。本課題在既往本實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)證實(shí)白蘿卜粗提物（Thecrudeextract of raphanus，Ecr）促胃腸動(dòng)力的作用，且確定其最佳作用劑量為1ml/kg基礎(chǔ)上，應(yīng)用電生理學(xué)、免疫組織化學(xué)熒光雙重標(biāo)記以及電子顯微鏡等實(shí)驗(yàn)方法，研究Ecr對胃電起搏區(qū)Cajal間質(zhì)細(xì)胞(Interstitial cells of cajal,ICCs)的活化作用及與Cajal間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的慢波傳遞作用密切相關(guān)的縫隙連接蛋白43（Connexin43

3、,Cx43）和細(xì)胞間連接反應(yīng)變化、小腸消化間期移行性復(fù)合肌電（Interdigestive Myoelectric Complex,IMC）及與ICCs相關(guān)興奮性胃腸激素P物質(zhì)（Subtance P,SP）等變化情況，探討Ecr促胃腸動(dòng)力的作用機(jī)制。旨在為開發(fā)出具有知識產(chǎn)權(quán)的促動(dòng)力中藥提供可靠的理論基礎(chǔ)。
　　方法：①采用免疫組化熒光雙重標(biāo)記ICCs與SP、ICCs與Cx43的方法，觀察Ecr作用對與ICCs密切關(guān)系的興奮性胃腸激

4、素SP及縫隙連接蛋白Cx43的影響；②采用電生理學(xué)方法觀察Ecr對大鼠小腸IMC周期、活動(dòng)期與周期的比值及活動(dòng)期的快波數(shù)目的影響；③采用透射電子顯微鏡的方法觀察Ecr作用后ICCs超微結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)及ENS神經(jīng)末梢-ICCs-SMC三者細(xì)胞間連接等關(guān)系特點(diǎn)。
　　結(jié)果：①Ecr能增加肌間神經(jīng)叢和肌內(nèi)SP及與ICCs結(jié)合的SP的表達(dá)，而對黏膜層和黏膜下層SP的表達(dá)無明顯影響；②Ecr能增加肌間神經(jīng)叢和肌層Cx43的表達(dá)，及與ICCs結(jié)合

5、的Cx43的表達(dá)；③Ecr能促進(jìn)小腸IMC活動(dòng)期的快波節(jié)律，縮短IMC周期，及增加活動(dòng)期占整個(gè)周期的比值；④電子顯微鏡研究也證實(shí)ICCs有豐富的線粒體和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，ICCs與神經(jīng)末梢密切聯(lián)系，與SMC形成縫隙連接。并且發(fā)現(xiàn)ICCs與SMC之間一種特殊的細(xì)胞間密切連接的方式。
　　結(jié)論：Ecr促進(jìn)胃腸動(dòng)力的外周機(jī)制可能是通過促進(jìn)ICCs的電活動(dòng)、促進(jìn)與ICCs密切相關(guān)的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)SP的表達(dá)和促進(jìn)ICCs與相鄰ICCs及SMC之間