富氫液對大鼠全腦血再灌注損傷后海馬神經(jīng)元線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔的影響.pdf

1、目的：觀察富氫液對大鼠全腦缺血再灌注損傷后海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔和細胞凋亡的影響并探討其潛在的機理。
　　方法：雄性SD大鼠144只，體重250～300 g，隨機分為6組(n=24)：假手術(shù)組(S組)、缺血再灌注組(IR組)、生理鹽水組(NS組)、富氫液組(H組)、蒼術(shù)苷組(A組)和富氫液+蒼術(shù)苷組(HA組)。采用四血管阻塞法建立大鼠全腦缺血再灌注模型，缺血15 min后恢復灌注。H組和HA組于再灌注即刻腹腔注射富氫液5ml/kg

2、，其余組腹腔注射等容量生理鹽水；A組和HA組于再灌注前10 min行側(cè)腦室注射蒼術(shù)苷15μl，NS組和H組側(cè)腦室注射等容量生理鹽水。再灌注24 h時行神經(jīng)行為學損傷程度評價，評價后迅速斷頭，分離海馬神經(jīng)細胞線粒體，采用分光光度計法測定mPTP的開放程度，Western blot法測定海馬線粒體和胞漿的細胞色素c(Cyt c)水平，免疫組化法觀察Bc1-2、Bax在海馬CA1區(qū)表達，并計算Bc1-2和Bax表達的比值(Bc1-2/Bax)

3、，透射電鏡觀察海馬CA1區(qū)線粒體超微結(jié)構(gòu)；再灌注72 h時取海馬組織，光鏡下觀察CA1區(qū)形態(tài)學結(jié)果，并計數(shù)該區(qū)神經(jīng)元存活數(shù)。
　　結(jié)果：與S組比較，其余組再灌注24 h時行為學損傷程度加重，mPTP活性升高，線粒體Cyt c表達下調(diào)，胞漿Cyt c表達上調(diào)，Bc1-2和Bax表達上調(diào)(P<0.05)；與R組比較，H組和HA組再灌注24 h時行為學損傷減輕，mPTP活性降低，線粒體Cyt c表達上調(diào)，胞漿Cyt c表達下調(diào)，Bc1-

4、2表達上調(diào)，Bax表達下調(diào)(P<0.05)；與H組比較，HA組行為學損傷加重，mPTP活性升高，線粒體Cyt c表達下調(diào)，胞漿Cyt c表達下調(diào)，Bc1-2表達下調(diào)，Bax表達上調(diào)(P<0.05)。透射電鏡結(jié)果顯示富氫液可以改善線粒體超微結(jié)構(gòu)的改變，蒼術(shù)苷可部分消除富氫液的上述改變。再灌注72 h時HA組較IR組神經(jīng)元存活數(shù)增加(P<0.05)，H組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷較IR組、Ns組、A組和HA組減輕。
　　結(jié)論：富氫液可減輕