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1、目的:探討630 nm弱激光在鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型皮膚創(chuàng)傷愈合過(guò)程中的作用,分析功率密度與糖尿病大鼠皮膚愈合效果間的對(duì)應(yīng)關(guān)系,為進(jìn)一步討論弱激光促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的作用機(jī)制,支持弱激光療法的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:36只雄性Wistar大鼠通過(guò)尾靜脈注射STZ制備糖尿病模型。每只大鼠的背部造兩個(gè)10 mm×10 mm的方形皮膚全層切割型創(chuàng)口。36只大鼠隨機(jī)分為3個(gè)弱激光治療組和1個(gè)空白對(duì)照組,每組9只大鼠。各弱激光治
2、療組于制備全層皮膚缺損創(chuàng)面后立即實(shí)施第1次照射,每周照射5次,連續(xù)照射2周。3個(gè)弱激光治療組采用能量密度恒定為3.6 J/cm2,功率密度分別為5 mW/cm2、10mW/cm2和20 mW/cm2的630 nm連續(xù)輸出型半導(dǎo)體激光。弱激光治療實(shí)施前和實(shí)驗(yàn)第14天,分別對(duì)各組大鼠進(jìn)行尾靜脈采血,測(cè)量、記錄每只大鼠的血糖水平。弱激光治療開(kāi)始后第3、6、9及12天,對(duì)各組大鼠創(chuàng)面進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化攝影,記錄每只大鼠創(chuàng)口的創(chuàng)面,采用ImageJ軟件進(jìn)
3、行計(jì)算機(jī)圖形處理、計(jì)算創(chuàng)傷面積收縮率。弱激光治療開(kāi)始后第4、8和14天,每組隨機(jī)選取并處死3只大鼠,手術(shù)取其創(chuàng)面組織樣本。對(duì)樣本進(jìn)行定性及半定量的組織病理學(xué)評(píng)價(jià)(HE染色和Masson染色),并采用免疫組化方法檢測(cè)創(chuàng)傷組織中bFGF、TGF-β和VEGF的表達(dá)情況。
結(jié)果:弱激光治療前后,各組大鼠的血糖水平保持在相似的水平上,均未見(jiàn)顯著差異(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)第3天,只有20 mW/cm2組的創(chuàng)面收縮明顯快于空白對(duì)照組(P<
4、0.05)。實(shí)驗(yàn)第6天和第9天,三個(gè)弱激光治療組的創(chuàng)面收縮均明顯快于對(duì)照組(P<0.05)。組織病理學(xué)分析發(fā)現(xiàn):弱激光治療組較空白對(duì)照組,炎癥減輕,表皮再植加快,肉芽組織更成熟,膠原沉積更豐富。其中20 mW/cm2組療效最為明顯。實(shí)驗(yàn)第4天,10 mW/cm2組和20 mW/cm2組的膠原合成水平與空白對(duì)照組相比,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。三個(gè)劑量的弱激光照射組bFGF和TGF-β1蛋白表達(dá)均明顯增加(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)第8天
5、,20 mW/cm2組與空白對(duì)照組相比,在多形核白細(xì)胞、表皮再植、成纖維細(xì)胞和膠原的數(shù)據(jù)上,均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。10 mW/cm2組和空白對(duì)照組在成纖維細(xì)胞和膠原纖維數(shù)據(jù)上,均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。三個(gè)劑量的弱激光照射組的VEGF蛋白表達(dá)均明顯增加(P<0.05)。5 mW/cm2組和20 mW/cm2組bFGF蛋白表達(dá)均明顯增加(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)第14天,空白對(duì)照組的新血管評(píng)分與5 mW/cm2組和20 m
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