補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)腦缺血再灌注大鼠血管新生過(guò)程中VEGF、VEGFR-1的影響.pdf

1、　　目的：在血管內(nèi)皮抑制素抑制血管新生的條件下,研究補(bǔ)陽(yáng)還五湯作用于大腦中動(dòng)脈栓塞腦缺血再灌注模型(Ischemia-Reperfusion ,I/R)大鼠,通過(guò)檢測(cè)血清中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)含量,海馬區(qū)VEGFR-1及微血管密度(MVD),探討補(bǔ)陽(yáng)還五湯促進(jìn)大腦中動(dòng)脈 I/R模型大鼠缺血損傷區(qū)血管新生的機(jī)理,為補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療缺血性腦血管疾病的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：采用“線(xiàn)栓法

2、”制作大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞I/R模型,動(dòng)物分為空白對(duì)照組(空白組)、假手術(shù)組、模型組、血管內(nèi)皮抑制素組(抑制素組)、補(bǔ)陽(yáng)還五湯干預(yù)抑制素組(干預(yù)組)、補(bǔ)陽(yáng)還五湯組(中藥組),每組15只。中藥組、干預(yù)組自造模前3天開(kāi)始給予補(bǔ)陽(yáng)還五湯濃縮液 15ml/kg體重灌胃,假手術(shù)組,模型組,抑制素組用等量生理鹽水灌胃,每日一次,至造模后 14天,連用17天；抑制素組、干預(yù)組造模前兩天在立體定位儀下用微量進(jìn)樣器向側(cè)腦室注入血管內(nèi)皮抑制素
　　

3、5μL,假手術(shù)組、模型組、中藥組給予等量生理鹽水,之后每隔 3天重復(fù)用藥一次,至第13天。再灌注第14天所有大鼠腹主動(dòng)脈取血清,斷頭取腦。取大腦嗅球后6至11mm的腦組織,用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定外周血 VEGF及MMP-9的含量,用免疫組化法測(cè)定海馬區(qū) VEGFR-1表達(dá)水平,計(jì)數(shù)CD34表達(dá)水平計(jì)算梗死部位微血管密度。
　　結(jié)果：
　　(1) 神經(jīng)功能缺損評(píng)分,模型組顯著高于假手術(shù)組、空白組(P<0.01)；與模型組

4、相比：抑制素組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分較高、中藥組評(píng)分低,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　(2) 與模型組相比：抑制素組微血管密度降低(P<0.05)；干預(yù)組、中藥組微血管密度顯著升高(P<0.01)；
　　(3) 與模型組相比：抑制素組海馬區(qū)VEGFR-1較低(P<0.05)；干預(yù)組VEGFR-1表達(dá)水平升高(P<0.05)；中藥組VEGFR-1表達(dá)水平顯著升高(P<0.01)；(4) 與模型組相比：抑制素組血清VEGF、MMP

5、-9含量降低(P<0.01,P<0.05)；干預(yù)組血清VEGF、MMP-9含量升高(P<0.05,P<0.01)；
　　結(jié)論：
　　(1) 血管內(nèi)皮抑制素能抑制腦組織VEGFR-1表達(dá)水平和外周血VEGF、MMP-9含量,同時(shí)減低梗死區(qū)微血管密度的增加程度。
　　(2) 補(bǔ)陽(yáng)還五湯在腦缺血時(shí)的腦保護(hù)機(jī)制與其上調(diào) VEGFR-1表達(dá)水平、及VEGF、MMP-9含量的作用有關(guān)。
　　(3) 對(duì)補(bǔ)陽(yáng)還五

6、湯提取芳香水,并與水煎液減壓濃縮,能有效的保留原有藥材的有效成分,提高藥物的生物利用度,降低灌胃量,便于臨床用藥。
　　(4) 通過(guò)側(cè)腦室直接注射給藥可以使藥物直接進(jìn)入側(cè)腦室,避免在體內(nèi)流動(dòng)過(guò)程中的損耗,且不用考慮血腦屏障的因素,操作簡(jiǎn)便易行,且死亡率不高,具有實(shí)用性,在研究直接作用于腦神經(jīng)的藥物時(shí),是一種理想的辦法。
　　(5) 應(yīng)用改進(jìn)的線(xiàn)栓法制作大腦中動(dòng)脈栓塞腦缺血再灌注大鼠模型,效果良好,神經(jīng)功能缺損評(píng)分理想