高壓氧對成年大鼠腦缺血再灌注損傷后血管新生的影響.pdf

1、腦血管病是臨床上的常見疾病，而其中缺血性腦血管病占最大比例。盡管溶栓、抗栓治療和康復(fù)治療在減少急性腦梗死的死亡率和致殘率，促進神經(jīng)功能恢復(fù)方面發(fā)揮了重要作用，但就總體而言，缺血性腦卒中尚缺乏理想的有效治療方法。高壓氧(Hyperbaricoxygen,HBO)作為一種無創(chuàng)療法，對腦血管病的療效已逐步得到了臨床認可。近年來的國內(nèi)外研究顯示高壓氧能夠明顯減輕腦水腫，保護血腦屏障，減少梗死灶體積，促進神經(jīng)功能恢復(fù)等等，但是具體機制尚不清楚，對

2、能否促進腦部微血管新生也少見報道。
　　本實驗采用成年大鼠大腦中動脈栓塞模型（MCAO），通過與常壓氧的比較，觀察HBO治療對成年大鼠腦缺血再灌注損傷后微血管新生的影響，為進一步闡明HBO治療腦缺血再灌注損傷的機制提供新的思路和實驗依據(jù)。本實驗采用成年雄性SD大鼠，隨機分為假手術(shù)組（SS組），缺血再灌注組（IR組）、常壓氧治療組（NBO組）和高壓氧治療組（HBO組）。采用線栓法制作大鼠MCAO模型，持續(xù)缺血1.5h后拔出栓子再灌注

3、。通過病理組織切片、TTC染色、免疫組織化學(xué)染色及WesternBlot技術(shù)，觀察HBO治療對大鼠各時間點VEGF、FLT-1、CD34、GFAP表達的影響。
　　本實驗結(jié)果如下：
　　1.神經(jīng)行為學(xué)評分：術(shù)后2h，各組大鼠基本蘇醒，均出現(xiàn)中度神經(jīng)功能障礙癥狀，無明顯差異。HBO組大鼠較NBO、IR組大鼠在7、10d時間點神經(jīng)功能障礙癥狀明顯改善，神經(jīng)學(xué)評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.TTC染色結(jié)果：SS組大鼠腦片全部

4、染為紅色，IR組出現(xiàn)白色梗死灶，主要分布于右側(cè)皮層及皮層下組織，嚴重者累及整個右側(cè)大腦半球。HBO組大鼠各時間點較IR組同時間點梗死體積均有所減少，7、10d組減少特別明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
　　(1)CD34、VEGF、Flt-1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：CD34陽性細胞多呈棕黃色條索狀，少數(shù)為圓形和橢圓形，主要位于新生的微血管上表達；VEGF、Flt-1陽性細胞呈棕黃色圓形和橢圓形，主要位于血

5、管內(nèi)皮細胞上表達。SS組CD34、VEGF、Flt-1陽性細胞僅少量表達，散在分布。IR、NBO組和HBO組各時間點較SS組，CD34、VEGF、Flt-1陽性細胞表達量均增多增大，主要表達于皮層區(qū)和梗死周邊，梗死區(qū)中央及對側(cè)非梗死區(qū)陽性細胞表達很少；NBO組較IR組各時間點，CD34、VEGF、Flt-1陽性細胞表達無明顯差異。HBO組CD34、VEGF、Flt-1陽性細胞表達較IR、NBO組同時間點均有所增加，而在7、10天增加增大

6、尤為明顯。
　　(2)GFAP免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：陽性細胞呈棕黃色星狀，由胞體和突觸組成。SS組陽性細胞表達較少，染色淺；IR組陽性細胞表達較SS組有所增多；HBO組陽性細胞表達較IR組明顯增加，胞體肥大，染色深。這提示HBO治療能夠促進星形膠質(zhì)細胞生長，改善神經(jīng)功能，保護腦組織。
　　4.Westernblot結(jié)果顯示：IR、HBO組與SS組比較，大鼠CD34表達量均明顯增加。HBO組與IR組比較，7、10d組大鼠CD3