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文檔簡介
1、第一部分、弱堿性抑癌液的設計
目的:盡管目前的癌癥療法在不斷的進步,但是癌癥患者經(jīng)過治療后經(jīng)常引起發(fā)轉移,對于癌癥迫切需要開發(fā)新的合理的療法。這里我們設計了弱堿性抑癌液。
方法:以KCl和NaHCO3為原料,探索mk/mNa以不同比例混合,用蒸餾水配制成500mL溶液,然后pH計測量pH值。
結果:當mk/mNa等于6時,即用KCl為24g,NaHCO3為4g,用蒸餾水配制成500mL溶液,此時溶液的pH值
2、剛好接近7.45。
結論:WACIL按mk/mNa=6,以NaHCO3、KCl分別為4g和24g,用蒸餾水定容至500mL,充分溶解后過濾而成。
第二部分、弱堿性抑癌液調控癌細胞生長、轉移及消亡的體外實驗研究
目的:測試WACIL是否調控癌細胞的生長轉移及消亡,然后試圖找到可能的調控機制。
方法:在體外,我們檢測WACIL對三種細胞株包括子宮頸鱗癌細胞SiHa、非小細胞肺鱗癌細胞H1299以及人乳
3、腺癌細胞MDA-MB-231的生長增殖,細胞周期,細胞凋亡,侵襲轉移的影響。
結果:WACIL明顯抑制三種細胞系的生長增殖,G2/M期細胞增多,出現(xiàn)G2/M期阻滯,阻止細胞周期的進程。細胞形態(tài)呈圓狀,細胞核濃縮,caspase-3活性檢測增加,線粒體的膜電位降低,細胞凋亡;活細胞數(shù)目減少,細胞膜破裂,發(fā)生消亡現(xiàn)象,癌細胞遷移明顯減少(P<0.001)。對目標基因的分析,SCCA1、cyclinB1、MMP-2以及MMP-9的m
4、RNA表達水平下調,Caspase-3的mRNA表達水平上調;SCCA1、cyclinB1和MMP-2蛋白表達下調,Caspase-3蛋白表達上調。
結論:弱堿性抑癌液調控癌細胞的生長和轉移,介導癌細胞消亡。更重要的是,本研究系統(tǒng)分析弱堿性抑癌液與癌的pH微環(huán)境之間的相互作用機制,可以發(fā)現(xiàn)改變癌細胞所處的微環(huán)境的重要性。
第三部分、弱堿性抑癌液對移植瘤生長和轉移的影響的體內實驗研究
目的:為了在體內研究弱堿
5、性抑癌液對癌細胞生長轉移的影響,并挖掘潛在的治療意義。
方法:建立MDA-MB-231細胞植入4周齡的BALB/C裸鼠頸背皮下的模型,觀察弱堿性抑癌液對裸鼠皮下腫瘤生長轉移的影響。
結果:體內動物實驗發(fā)現(xiàn)處理組的腫瘤生長較對照組明顯緩慢;肺組織HE染色未見明顯癌細胞轉移,而對照組可見癌細胞轉移;WACIL還可能有消退腫瘤血管增生的作用。
結論:在體內弱堿性抑癌液可以控制腫瘤的生長,并抑制癌細胞的轉移,對腫瘤
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