鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌中CXCR4與MMP-9表達(dá)的臨床和實驗研究.pdf

1、鼻腔鼻竇惡性腫瘤(Sinonasal malignancies，SNM)是一種相對少見的惡性腫瘤，占頭頸部腫瘤的11.9％。其中癌多于肉瘤，鱗狀細(xì)胞癌最多見，約占70％-80％，好發(fā)于上頜竇，其次是篩竇癌和鼻腔癌，原發(fā)于蝶竇和額竇的癌罕見。早期多無癥狀，不易察覺，而當(dāng)腫瘤發(fā)展到一定程度，出現(xiàn)較明顯的癥狀到醫(yī)院診治時，病情多已較嚴(yán)重。由于鼻腔鼻竇與口腔、眼眶、顱底等結(jié)構(gòu)毗鄰，腫瘤擴展常累及鄰區(qū)諸多重要組織器官，各種單一的治療方法均難對此區(qū)

2、病變達(dá)到滿意的療效。因此，對發(fā)生在此部位的惡性腫瘤的治療仍然是耳鼻咽喉科面臨的一大難題。
　　浸潤和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要特征，是癌細(xì)胞與宿主細(xì)胞相互作用的連續(xù)復(fù)雜過程，這個過程需要多步驟、多因素相互作用共同完成。自Liotta提出發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的三步驟是粘附、基質(zhì)酶解、移動后，人們除對腫瘤的自身生長失控外，同時對腫瘤的遷移和細(xì)胞外基質(zhì)的降解上同樣做出了大量的研究。近年的研究表明，趨化因子受體4(CXC chemokinerecept

3、or4，CXCR4)是一類表達(dá)于不同細(xì)胞上含有7個跨膜區(qū)的G蛋白偶聯(lián)受體，與其配體基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(stromalcellderived factor-1，SDF-1)相互作用形成的反軸SDF-1/CXCR4可促進(jìn)腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移、促進(jìn)腫瘤增值和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞靶器官定向遷移，SDF-1也是目前已知唯一能與CXCR4結(jié)合并能激活其它的天然趨化因子。基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrixmetalloproteinase, MMP-9）是一類依賴鋅離

4、子的基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmatalloproteinases，MMPs)，激活之后可降解細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）中明膠、多種膠原及彈性纖維，尤其Ⅳ型膠原蛋白，而認(rèn)為該蛋白酶在腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。CXCR4活化后可以引起細(xì)胞多種細(xì)胞因子的分泌增加，但是在腫瘤細(xì)胞中CXCR4的活化是否能引起基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的分泌增加，目前的報道存在爭議。有報道CXCR4活化后腫瘤細(xì)胞分泌更

5、多的MMP（如MMP-2和MMP-9）、一氧化氮和血管生成因子(如VEGF)。也有報道認(rèn)為SDF-1與CXCR4作用后并沒有引起MMP-9的增加。但關(guān)于CXCR4與MMP-9在鼻腔鼻竇鱗癌中的研究目前甚少。
　　目的:
　　本研究通過在蛋白及細(xì)胞分子水平上檢測鼻腔鼻竇鱗癌組織中CXCR4和MMP-9的表達(dá)，并分析它們與鼻腔鼻竇鱗癌患者的主要臨床特征之間的關(guān)系以及兩者之間的相關(guān)性，來探討CXCR4和MMP-9在鼻腔鼻竇鱗癌發(fā)生

6、、浸潤和轉(zhuǎn)移中的作用。
　　材料與方法:
　　1、采用免疫組化法（immunohistochemistry，IHC）檢測64例鼻腔鼻竇鱗癌和27例癌旁正常黏膜組織中CXCR4和MMP-9蛋白的表達(dá)情況，并分析其與鼻腔鼻竇鱗癌患者主要臨床特征之間的關(guān)系以及各指標(biāo)之間的相關(guān)性。
　　2、用RT-PCR和Western-blot法在細(xì)胞分子水平上檢測27例鼻腔鼻竇鱗癌和癌旁正常黏膜組織中CXCR4和MMP-9的表達(dá)情況，并分

7、析二者之間的相關(guān)性。
　　3、采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)。①計數(shù)資料采用x2檢驗或Fisher確切概率法;②計量資料采用x±S表示，比較采用t檢驗;③CXCR4與MMP-9表達(dá)之間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析;④所有結(jié)果均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、CXCR4和MMP-9蛋白在鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)陽性率分別為78.13％和81.25％; CXCR4蛋白表達(dá)與患者年

8、齡、性別無關(guān)(x2=0.12、0.024，P＞0.05)，而與病理分級有關(guān)(x2=8.85，P＜0.05)，MMP-9表達(dá)也與腫瘤分化具有相關(guān)性(x2=8.26，P＜0.05)。CXCR4與MMP-9表達(dá)之間存在正相關(guān)(r=0.71，P＜0.05)。
　　2、CXCR4和MMP-9 mRNA在鼻腔鼻竇鱗癌組織中的表達(dá)分別是癌旁組織中的4.75和30.66倍(P＜0.05），Western blot蛋白半定量分析也顯示，兩者在鱗癌組

9、織中的蛋白半定量明顯高于癌旁組織（P＜0.05）。
　　3、Western blot檢測CXCR4和MMP-9蛋白在鼻腔鼻竇鱗癌組織中的表達(dá)具有正相關(guān)(P＜0.05），這與免疫組化結(jié)果一致，但CXCR4和MMP-9 mRNA的表達(dá)不具有相關(guān)性(P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、CXCR4和MMP-9在鼻腔鼻竇鱗癌組織中顯著高表達(dá)，且表達(dá)與患者的年齡、性別的關(guān)系無統(tǒng)計學(xué)意義，而與分化程度有相關(guān)性，提示二者與鼻腔鼻竇鱗