GPC3單克隆抗體介導(dǎo)阿霉素二氧化硅載藥納米顆粒對(duì)人肝癌細(xì)胞的體外殺傷效應(yīng).pdf

1、前言
　　肝癌是最臨床上最常見的惡性腫瘤之一，盡管在肝癌的診斷和治療上取得了很大的成績(jī)，但是由于80％的患者經(jīng)診斷通常為肝癌晚期，其病死率仍然很高?；熑允歉伟┗颊叩闹饕委煼椒?。采用傳統(tǒng)途徑給藥方法治療腫瘤，往往療效差，對(duì)患者毒副作用大。阿霉素(Doxorubicin，DOX)是臨床常用的蒽環(huán)類抗腫瘤藥物，抗瘤譜較廣泛，療效好，廣泛用于中晚期肝癌患者的治療，同時(shí)產(chǎn)生的嚴(yán)重毒副作用，如心臟毒性，治療指數(shù)低，臨床應(yīng)用受限。進(jìn)一步改善

2、肝癌治療的靶向性，提高局部藥物濃度，減輕藥物毒副作用，利用抗體介導(dǎo)載藥納米微粒，為新興的治療手段正在迅速發(fā)展。磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)是肝癌的一種新的腫瘤標(biāo)志。GPC3在肝癌組織中高表達(dá)，陽性表達(dá)率為70％-90％，在正常的肝組織中沒有表達(dá)。GPC3有望成為肝癌靶向治療的候選者。二氧化硅納米微粒作為無機(jī)納米顆粒材料，其制備簡(jiǎn)便、性質(zhì)穩(wěn)定、生物相容性好和表面易修飾，易從腎臟排出，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。本論文瞄準(zhǔn)抗體介導(dǎo)載

3、抗腫瘤藥物微粒這一前沿研究方向，基于二氧化硅納米顆粒作為抗腫瘤藥物載體這一主線，本課題旨在制備GPC3單克隆抗體介導(dǎo)載阿霉素二氧化硅納米微粒，研究其體外細(xì)胞毒性作用，為建立新的肝癌治療方法奠定理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)支持。
　　目的
　　制備GPC3單克隆抗體介導(dǎo)的載阿霉素二氧化硅納米微粒(GPC3antibody-SiO2-DOX)，探討研究其對(duì)體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞系HepG2的細(xì)胞毒性作用。
　　方法
　　1.采用E

4、DC作為中間連接體，利用交聯(lián)劑碳二亞胺(EDC)可在范德華力用作距離之內(nèi)的-COOH與-NH2之間形成交聯(lián)鍵的特點(diǎn)，誘導(dǎo)載藥二氧化硅納米微粒與GPC3單克隆抗體偶聯(lián)，制備GPC3antibody-SiO2-DOX免疫交聯(lián)物。采用圓二色譜儀對(duì)其表征，利用紫外分光光度計(jì)法計(jì)算載藥率及包封率。
　　2.HepG2細(xì)胞分別與SiO2、SiO2-DOX、GPC3antibody-SiO2-DOX、GPC3antibody-SiO2，培養(yǎng)一定

5、時(shí)間后，利用MTS比色法評(píng)價(jià)GPC3antibody-SiO2-DOX的細(xì)胞毒性作用，研究各納米微粒細(xì)胞毒性差異。
　　結(jié)果
　　1.制備的GPC3antibody-SiO2-DOX載藥量及包封率分別為22.6％和45.2％。圓二色譜儀表征，其抗體變化微弱，進(jìn)一步證實(shí)GPC3單克隆抗體交聯(lián)到載阿霉素二氧化硅納米微粒上。
　　2.SiO2、SiO2-DOX、GPC3antibody-SiO2-DOX、GPC3antibo