復(fù)配式粗雜糧對(duì)脂代謝紊亂大鼠膽汁酸代謝的調(diào)節(jié)及中老年人群CYP7A1基因-204C多態(tài)性與脂代謝紊亂的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：（1）觀察復(fù)配式粗雜糧對(duì)脂代謝紊亂大鼠糞膽汁酸排出量和TC、TG、LDL-C和HDI-C等血脂指標(biāo)的影響：（2）觀察復(fù)配式粗雜糧對(duì)膽汁酸代謝限速酶CYP7A1mRNA和其上游調(diào)控受體LXRαmRNA基因表達(dá)的影響，探討復(fù)配式粗雜糧改善脂代謝紊亂大鼠血脂和膽汁酸代謝的作用機(jī)制：（3）探討南京市中老年血脂異常人群和正常人群CYP7Al的基因分型及CYP7Al基因-204C多態(tài)性的突變頻率，了解CYP7Al各基因型與血脂異常的關(guān)系，從分

2、子水平闡述中老年人群血脂異常的遺傳學(xué)因素及發(fā)病機(jī)制。
　　 方法：（1）44只SPF級(jí)SD大鼠在實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為高脂模型對(duì)照組、米面組、復(fù)配式粗雜糧組和陰性對(duì)照組；參照美國營養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦的AIN-93M動(dòng)物合成飼料配方，在此基礎(chǔ)上適當(dāng)調(diào)整蛋白質(zhì)和蔗糖的比例，增加飽和脂肪酸含量，制成高脂飼料；同時(shí)用粳米粉、面粉和復(fù)配式粗雜糧粉代替高脂飼料中蔗糖和淀粉部分，配制成米面組飼料和粗雜糧組飼料。（2）實(shí)驗(yàn)開始后按適應(yīng)期攝食水

3、平供給飼料，初期給予低于適應(yīng)期喂養(yǎng)量10-20％的量，并在第1周逐日增加，至第2周達(dá)到適應(yīng)期喂養(yǎng)量，此后維持6周，確保每只大鼠的食物攝取量相同。連續(xù)喂養(yǎng)8周后，測定各組大鼠體重、血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、糞膽汁酸和LXRαmRNA、CYP7AlmRNA表達(dá)。（3）運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）技術(shù)，對(duì)南京地區(qū)漢族正常人群和血脂異

4、常人群CYP7A1基因A-204C多態(tài)性進(jìn)行分析，并研究各基因型與南京市中老年人群血脂異常的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：（1）動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明，與高脂模型對(duì)照組比較，大鼠的體重、血清Tc、TG、LDL-C水平顯著下降，HDL-C水平和糞膽汁酸排出量顯著升高（P<0.05）；LXRαmRNA、CYP7A1mRNA表達(dá)顯著升高（P<0.05）。（2）血脂異常組人群CYP7Al基因-204C中A等位基因頻率（男女合計(jì)）為15.0％，C等位基

5、因頻率（男女合計(jì)）為85％1正常對(duì)照組人群CYP7A1基因-204C中A等位基因頻率（男女合計(jì)）為15.4％，C等位基因頻率（男女合計(jì)）為84.6％。差異具無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。血脂異?；颊呓M中AA、AC、CC基因型之間TC的差異有顯著性（p<0.05），同時(shí)AA基因型患者的HDL-C，LDL-C水平較AC、CC基因型患者顯著降低（p<0.05）。即AA基因型與血漿HDI-C、LDL-C水平下降存在明顯相關(guān)性，AC、CC基因型患

6、者間HDL-C，LDL-C間差異不顯著，但CC、AC、AA各基因型之間HDL-C、LCL-C呈下降趨勢：正常對(duì)照組人群中僅CC和AC的TC水平差異有顯著性（p<0.05）。
　　 結(jié)論：（1）復(fù)配式粗雜糧對(duì)高脂飼料誘導(dǎo)的脂代謝紊亂大鼠具有顯著的改善作用。其機(jī)制可能與復(fù)配式粗雜糧豐富的營養(yǎng)成份有密切關(guān)系，其可能的機(jī)制包括：①粗雜糧中所含的大豆異黃酮可以誘導(dǎo)LXRα的表達(dá)，與順式作用元件結(jié)合，進(jìn)而調(diào)控其下游膽固醇7α羥化酶的活性，從

7、而通過膽汁酸合成的經(jīng)典途徑促進(jìn)動(dòng)物體內(nèi)膽汁酸合成的增加，即促進(jìn)膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化，從而促進(jìn)膽固醇的排泄，最終降低血膽固醇的濃度。②粗雜糧中豐富的膳食纖維可以有效的增加實(shí)驗(yàn)大鼠糞膽汁酸的排出量，使體內(nèi)膽汁酸合成代償性增加，從而促使膽汁酸合成經(jīng)典途徑中限速酶CYP7Al和其上游受體LXRα mRNA表達(dá)的增強(qiáng)。使體內(nèi)參與膽汁酸合成的膽固醇量增加，導(dǎo)致血中膽固醇被轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟中參與膽汁酸的合成，從而可以致使大鼠血中TC、TG和LDL-C水平降