益腦素改善學(xué)習(xí)記憶功能的作用及機制的實驗研究.pdf

1、目的:
　　通過東莨菪堿、亞硝酸鈉以及乙醇分別建立記憶獲取障礙模型、記憶鞏固障礙模型和記憶再現(xiàn)障礙模型，并采用中藥提取物益腦素進行干預(yù)，觀察益腦素對于大腦記憶行為的保護作用。并以此為基礎(chǔ)，探究益腦素對記憶重要相關(guān)因子谷氨酸、γ-氨基丁酸和乙酰膽堿酯酶的影響。并且探討益腦素對于突觸前膜因子Syp和突觸后膜蛋白PSD-95的影響。
　　方法:
　?、倮肕orris水迷宮實驗，探究益腦素對正常小鼠記憶能力的影響;
　

2、?、诶肕orris水迷宮實驗及跳臺實驗，探究益腦素對東莨菪堿造成的記憶獲取障礙模型的影響;
　?、劾锰_實驗，探究益腦素對亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙模型的影響;
　?、芾锰_實驗，探究益腦素對乙醇造成的記憶再現(xiàn)障礙模型的影響;
　?、堇脰|莨菪堿造小鼠記憶障礙模型，探究益腦素對神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影響，以及對乙酰膽堿酯酶活性的影響;
　?、蘩脰|莨菪堿造小鼠記憶障礙模型，使用免疫組化技術(shù)、We

3、stern Blotting及RT-PCR技術(shù)，探究益腦素對于突觸前膜突觸囊泡蛋白及突觸后膜致密結(jié)構(gòu)蛋白表達的影響。
　　結(jié)果:
　?、僬Ｐ∈笥洃浤芰Φ挠绊?，Morris水迷宮實驗結(jié)果:與正常組比，吡拉西坦片組、益腦素高劑量組動物逃避潛伏期顯著縮短;吡拉西坦片組、益腦素高、中劑量組動物穿臺次數(shù)顯著增加;吡拉西坦片組、益腦素高劑量組動物平臺周邊活動路程和時間或中央活動路程和時間均顯著增加。
　?、趯|莨菪堿造成的記憶獲

4、取障礙模型的影響，Morris水迷宮實驗結(jié)果:與正常組相比，模型組動物逃避潛伏期顯著延長，平臺周邊活動路程和時間顯著縮短，穿臺次數(shù)顯著減少中央活動路程和時間也有所縮短，提示模型動物出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶障礙。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素高、中、低組動物逃避潛伏期顯著縮短，平臺周邊活動路程和時間或中央活動路程和時間均有不同程度的增加。跳臺實驗結(jié)果:與正常組相比，模型組動物潛伏期縮短，錯誤次數(shù)、錯誤動物數(shù)顯著增加，提示動物出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶障礙。與模

5、型組相比，吡拉西坦片組、益腦素高、中劑量組動物潛伏期有所延長，錯誤次數(shù)也有減少的趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　③對亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙模型的影響，跳臺實驗結(jié)果:與正常組相比，模型組動物潛伏期縮短，錯誤次數(shù)、錯誤動物數(shù)顯著增加，提示造模成功。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、中、高劑量組組動物潛伏期有所延長，錯誤次數(shù)也有減少的趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　?、軐σ掖荚斐傻挠洃浽佻F(xiàn)障礙模型的影響，跳臺實驗結(jié)果:與正常

6、組相比，模型組動物潛伏期縮短，錯誤次數(shù)、錯誤動物數(shù)顯著增加，提示造模成功。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、中劑量組動物錯誤次數(shù)顯著減少，益腦素低劑量組動物潛伏期、錯誤動物只數(shù)顯著減少。
　　⑤對神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影響，以及對乙酰膽堿酯酶活性的影響:與正常組相比，模型組動物AChE活性顯著增強，Glu及γ-GABA含量顯著降低，提示造模成功。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、中、高劑量組動物AChE活性顯著

7、減少，吡拉西坦片組、益腦素低劑量組動物Glu及γ-GABA含量顯著增加。
　?、迣ν挥|前膜突觸囊泡蛋白及突觸后膜致密結(jié)構(gòu)蛋白表達的影響:與正常組相比，模型組動物Syp基因表達量顯著下降，PSD-95基因表達量顯著上升。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、高劑量組動物Syp基因表達量顯著增加，益腦素低、中劑量組動物PSD-95基因表達量顯著降低。WB實驗結(jié)果與基因表達量有著相同的趨勢。
　　結(jié)論:
　　益腦素能夠增強正