滌痰湯對(duì)學(xué)習(xí)記憶障礙模型小鼠的改善作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的： 本實(shí)驗(yàn)以東莨菪堿、亞硝酸鈉和乙醇分別致小鼠獲得性、鞏固性和再現(xiàn)性記憶障礙模型，采用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)觀察滌痰湯對(duì)學(xué)習(xí)記憶三個(gè)環(huán)節(jié)的影響，并檢測(cè)乙酰膽堿酯酶、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺以及大腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡率。探討滌痰湯改善記憶功能的作用環(huán)節(jié)和作用途徑，為滌痰湯改善學(xué)習(xí)記憶障礙提供科學(xué)依據(jù)。 方法： 昆明種小鼠72只，雄性，隨機(jī)分為3組，即正常組(A組)、模型組(B組)、滌痰湯組(C組)，每組24只。分別以生理鹽水(A組)、

2、生理鹽水(B組)、滌痰湯(C組)灌胃，每日1次，共3周。各組小鼠用跳臺(tái)法訓(xùn)練并檢測(cè)學(xué)習(xí)記憶能力，采用流式細(xì)胞儀法檢測(cè)小鼠大腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡率、免疫組織化學(xué)法檢測(cè)皮質(zhì)區(qū)AchE表達(dá)、高效液相色譜法測(cè)定大腦內(nèi)多巴胺含量。 結(jié)果： 1．跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)表明： 1.1對(duì)學(xué)習(xí)記憶獲得障礙的影響模型組在訓(xùn)練與測(cè)試過程中，錯(cuò)誤次數(shù)都較正常組明顯增加，潛伏期較正常組明顯縮短，且差異顯著(P＜0．01)，表明記憶獲得障礙模型的制作是成功的。

3、滌痰湯組的訓(xùn)練成績(jī)與測(cè)試成績(jī)皆顯著好于模型組(P＜0.01)，而與正常組相比，滌痰湯組的訓(xùn)練成績(jī)具有差異顯著性(P＜0.05)，測(cè)試成績(jī)與之無差異。說明滌痰湯對(duì)小鼠記憶獲得障礙模型有顯著的改善作用。 1.2對(duì)學(xué)習(xí)記憶鞏固障礙的影響在未造模時(shí)，滌痰湯組的訓(xùn)練成績(jī)明顯好于模型組及正常組(P＜0.05)，正常組和模型組兩組訓(xùn)練成績(jī)相比較，無差異(P＞0.05)，表明滌痰湯對(duì)記憶減退有預(yù)防作用。與正常組相比較，模型組和滌痰湯組測(cè)試成績(jī)錯(cuò)

4、誤次數(shù)明顯增多、潛伏期縮短，有顯著差異(P＜0．01)，表明記憶鞏固障礙模型建立成功，滌痰湯組的測(cè)試成績(jī)好于模型組(P＜0.05)，表明滌痰湯對(duì)亞硝酸鈉所造成的記憶鞏固障礙有抑制作用。 1.3對(duì)學(xué)習(xí)記憶再現(xiàn)障礙的影響未造模時(shí)，滌痰湯組訓(xùn)練成績(jī)明顯好于模型組及正常組(P＜0.05)，同組比較，正常組訓(xùn)練與測(cè)試成績(jī)兩者沒有差異，但模型組訓(xùn)練成績(jī)明顯好于測(cè)試成績(jī)，有顯著性差異(P＜0.01)，表明造模后，模型組小鼠記憶再現(xiàn)發(fā)生了障礙，

5、說明模型是成功的。而造模后，滌痰湯組測(cè)試成績(jī)明顯好于模型組，與正常組相比較，無顯著差異(P＜0.01)；說明滌痰湯對(duì)記憶再現(xiàn)障礙有明顯的改善作用。 2．流式細(xì)胞儀法檢測(cè)小鼠大腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡率的實(shí)驗(yàn)表明： 正常組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率為1.189±0.889％。模型組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率明顯增高為3.986±1.195％，與正常組比較有顯著性差異(P＜0．01)，表明記憶障礙模型是成功的；滌痰湯組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率為1.659±1.078％

6、，較模型組下降，有顯著性差異(P＜0.01)，與正常組相比較，無明顯性差異(P＞0.05)，說明滌痰湯有明顯抑制小鼠腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用，表現(xiàn)為凋亡細(xì)胞數(shù)減少、細(xì)胞凋亡率降低。 3．對(duì)AchE的影響與正常組比較，模型組神經(jīng)元胞膜及胞漿明顯黃染加深，提示模型組AchE表達(dá)量增高；而滌痰湯組神經(jīng)元胞膜及胞漿黃染較模型組明顯變淺，較正常組顏色稍深，表明滌痰湯組的AchE表達(dá)顯著降低。經(jīng)圖像分析測(cè)定，模型組較正常組的積分光密度明顯增加

7、，有顯著差異(P＜0.01)；而滌痰湯組積分光密度降低，與模型組相比較，有明顯差異(P＜0.05)，表明滌痰湯組可使AchE的表達(dá)明顯降低。 4．高效液相色譜法測(cè)定多巴胺含量的實(shí)驗(yàn)表明模型組小鼠腦中DA含量明顯降低，與正常組小鼠相比較有顯著性差異(P＜0.01)；而滌痰湯可以明顯抑制DA含量的下降，與模型組相比較有差異，(P＜0.05)，而與正常組相比較，差異不明顯。 結(jié)論： 1．東莨菪堿、亞硝酸鈉、乙醇分別對(duì)記

8、憶的三個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行阻斷所致的記憶障礙動(dòng)物模型，記憶損害確實(shí)、損害環(huán)節(jié)明確、造模方法簡(jiǎn)單，較好的模擬了記憶減退的特點(diǎn)，是一種成熟可靠的記憶障礙模型。 2．滌痰湯可顯著改善記憶障礙模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶獲得、再現(xiàn)障礙；對(duì)記憶鞏固障礙稍有改善。 3．滌痰湯可通過提高腦組織中多巴胺的含量、降低皮質(zhì)區(qū)AchE的表達(dá)、抑制大腦神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，對(duì)學(xué)習(xí)記憶起到預(yù)防和改善作用。 4．中醫(yī)“痰”的理論與記憶的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系，化痰宣竅