我國菰米改善胰島素抵抗作用及其機制的實驗研究.pdf

1、目的:
　　 (1)了解我國菰米提取物對棕櫚酸誘導(dǎo)的胰島素抵抗HerpG2細胞葡萄糖攝取率的影響,以及對胰島素抵抗細胞胰島素受體底物(IRS-2)、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP-1B)、中性粒細胞凝膠酶脂質(zhì)相關(guān)運載蛋白2(Lcn2mRNA)表達的影響;
　　 (2)了解我國菰米對胰島素抵抗大鼠糖脂代謝相關(guān)因子的影響,及對IRS-2、PTP-1B、Lcn2 Mrna表達水平的影響,探討中國菰米改善胰島素抵抗的作用機制;

2、　　 (3)闡明細胞實驗和動物實驗中Lcn2與胰島素抵抗的關(guān)系。
　　 方法:
　　 (1)用棕櫚酸誘導(dǎo)HepG2細胞發(fā)生胰島素抵抗,用葡萄糖試劑盒檢測細胞對葡萄糖的消耗量,然后加入適當(dāng)濃度的菰米提取物,觀察菰米提取物對HepG2細胞的葡萄糖消耗量的作用,同時測定細胞中IRS-2、PTP-1B、Lcn2 Mrna的表達,用米面組作對照。
　　 (2)44只雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機分成陰性對照組、菰米組

3、、米面組和胰島素抵抗模型組;實驗開始前,大鼠斷尾取血,離心分離血清,測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS);
　　 (3)在AIN-93M動物合成飼料配方的基礎(chǔ)上適當(dāng)調(diào)整蛋白質(zhì)和蔗糖的比例,增加飽和脂肪酸含量,同時用粳米粉、面粉和菰米粉代替高脂飼料中蔗糖和淀粉部分,配制成米面組飼料和菰米組飼料。
　　 (4)連續(xù)喂養(yǎng)8周,每2周尾靜脈采血測定大

4、鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(Ins)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C);8周后,測定大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(Ins)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),頸椎脫臼處死大鼠,分離腎周和睪周脂肪,稱重,計算脂體比。計算大鼠的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR),測定大鼠肝臟中IRS-2、PTP-1B、Lcn2 Mrna表達。
　　 結(jié)果:
　　

5、 (1)棕櫚酸誘導(dǎo)HepG2細胞發(fā)生胰島素抵抗,表現(xiàn)為HepG2細胞對葡萄糖的攝取利用能力下降。與米面提取物相比,菰米提取物能夠使細胞對葡萄糖的攝取能力提高,改善其胰島素抵抗的程度。與模型組和米面組相比IRS-2表達顯著升高(P＜0.05),PTP-IB、Lcn2表達顯著降低(P＜0.05)。
　　 (2)動物實驗結(jié)果表明,與胰島素抵抗組和米面組大鼠相比,菰米組大鼠的體重,空腹血糖、胰島素水平、胰島素抵抗指數(shù)、總膽固醇、甘油三

6、酯、內(nèi)臟脂肪量和脂體比明顯下降,高密度脂蛋白膽固醇水平顯著升高。IRS-2表達顯著升高(P＜0.05),Lcn2、PTP-1B表達顯著降低(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)細胞和動物實驗結(jié)果顯示,菰米具有改善胰島素抵抗的作用。其可能機制是通過調(diào)節(jié)游離脂肪酸含量,抑制PTP-1B的表達,促進IRS-2的磷酸化,增強胰島素信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用,進而起到改善胰島素抵抗的效果。
　　 (2)Lcn2可能是胰島素抵抗