乙胺嘧啶協(xié)同替莫唑胺聯(lián)合用藥對(duì)小鼠垂體促性腺激素腺瘤細(xì)胞的影響.pdf

1、背景：
　　 垂體瘤目前的治療手段包括手術(shù)、放療、藥物等,但都有尚不完善的方面,尤其對(duì)于反復(fù)復(fù)發(fā)的一些大腺瘤來(lái)說(shuō)。替莫唑胺(TMZ)是DNA烷化劑類化療藥,可透過(guò)血腦屏障,治療膠質(zhì)瘤和其他顱內(nèi)腫瘤。目前TMZ在垂體瘤上的試驗(yàn)性用藥尚處起步階段,已發(fā)現(xiàn)對(duì)部分患者效果不佳,出現(xiàn)耐藥的情況。有研究發(fā)現(xiàn)二氫葉酸還原酶抑制物乙胺嘧啶(PYR)協(xié)同替莫唑胺可使原對(duì)TMZ耐藥的黑色素瘤細(xì)胞重新對(duì)常規(guī)用量TMZ敏感。若此協(xié)同作用對(duì)耐TMZ垂體腺

2、瘤亦有效,則將會(huì)是垂體瘤TMZ治療的一項(xiàng)進(jìn)步。
　　 目的：
　　 探索與替莫唑胺協(xié)同能克服腫瘤對(duì)其耐藥性的藥物,證明替莫唑胺在乙胺嘧啶協(xié)同下,能夠增強(qiáng)其治療垂體腺瘤時(shí)的細(xì)胞毒作用和抗耐藥性,并探索其作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 普通細(xì)胞培養(yǎng)、耐藥細(xì)胞篩選、MTS測(cè)細(xì)胞相對(duì)存活率、臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)細(xì)胞死亡率、PI染色流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)細(xì)胞周期分期、蛋白免疫印跡(Western Blot)測(cè)細(xì)胞特定蛋白相對(duì)含量等

3、
　　 結(jié)果和結(jié)論：
　　 1.本實(shí)驗(yàn)在離體細(xì)胞水平證實(shí)了TMZ在PYR協(xié)同下,能夠增強(qiáng)其治療垂體腺瘤的細(xì)胞毒作用。結(jié)合PYR的藥物特性,可以認(rèn)為PYR是垂體腺瘤TMZ治療的有潛力的聯(lián)合用藥伙伴。
　　 2.本實(shí)驗(yàn)嘗試篩選了對(duì)替莫唑胺相對(duì)耐藥的小鼠促性腺激素腺瘤αT3—1細(xì)胞,在500 umol/L的替莫唑胺環(huán)境中能穩(wěn)定存活、緩慢增殖。其替莫唑胺拮抗蛋白MGMT含量有所升高。
　　 3.對(duì)上述相對(duì)耐藥的細(xì)

4、胞株,TMZ+PYR聯(lián)合用藥的協(xié)同作用較普通細(xì)胞株更顯著,提示PYR的存在能增強(qiáng)TMZ的抗耐藥性。臨床上TMZ治療效果不滿意的垂體腺瘤,可嘗試加用PYR聯(lián)合用藥治療,以避免增大TMZ用量引起的較強(qiáng)副作用。
　　 4.本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了TMZ單藥的DNA破壞、促凋亡及G2期阻滯作用,符合其理論機(jī)制；驗(yàn)證了PYR單藥的DNA破壞、促凋亡及S期阻滯作用,并證實(shí)上述細(xì)胞毒作用源于PYR的葉酸拮抗效應(yīng)。
　　 5.TMZ+PYR聯(lián)合用藥