脂肪源性ApoE對糖尿病小鼠脂肪組織的生物特性及脂代謝調(diào)節(jié)的影響.pdf

1、目的：
　　研究將鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的糖尿病(DM)ApoE-/-小鼠的白色脂肪移植至其野生型正常及糖尿病小鼠。觀察移植后脂肪組織ApoE表達(dá)情況；及脂肪細(xì)胞形態(tài)、脂肪組織脂質(zhì)含量、脂肪組織主要調(diào)節(jié)酶系基因表達(dá)改變，并與野生小鼠脂肪組織對比。以初步明確脂肪源性ApoE對脂肪組織生物學(xué)特性及脂肪代謝的影響和和可能機(jī)制。
　　方法：
　　鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的野生型糖尿病(WTDM)小鼠、糖尿病ApoE-/-（E

2、KODM）小鼠模型分別為15只、35只；ApoE-/-(EKO)小鼠及野生型(WT)小鼠各為15只。EKODM及WTDM小鼠造模成功后給予普通飼料飼養(yǎng)4周，分離20只EKODM小鼠腹腔內(nèi)白色脂肪組織分別以塊狀移植至10只WTDM小鼠、10只WT小鼠背部，受體鼠術(shù)后飼養(yǎng)8周。于術(shù)前、術(shù)后4周、術(shù)后8周監(jiān)測受體小鼠生命體征及空腹血糖、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)。于術(shù)后8周處死各組小鼠，采集腹部及受體小鼠背部的白色脂肪組織，稱重記錄。

3、光鏡下觀察四種小鼠腹部及兩種供體脂肪組織術(shù)后8周的形態(tài)特點(diǎn)及計算脂肪細(xì)胞體積；提取并檢測各組脂肪組織的TG、TC含量；實(shí)時熒光定量PCR法檢測各組脂肪組織載脂蛋白E(ApoE)、脂蛋白酯酶(LPL)、激素敏感型酯酶(HSL)、脂肪酸合成酶(FAS)的基因表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.血糖水平：EKODM及WTDM小鼠血糖較對照EKO及WT小鼠顯著升高隨時間呈上升趨勢(P<0.05)；對照小鼠血糖在實(shí)驗(yàn)過程中維持穩(wěn)定水平(P

4、>0.05)。
　　2.血脂水平：WTDM小鼠的TG水平高于WT組、EKO組、EKODM組小鼠(P<0.05)；EKO及EKODM小鼠TC水平較野生型鼠明顯升高(P<0.05)。WT及WTDM組TG、TC水平在脂肪移植前后無明顯差異(P>0.05)。
　　3.脂肪細(xì)胞形態(tài)：術(shù)后8w，EKODM鼠白色脂肪組織作為供體移植至WT鼠(EKODM→WT組)及WTDM鼠(EKODM→WTDM組)的脂肪細(xì)胞的平均橫截面積較EKODM鼠明

5、顯增大(P<0.05)，EKODM→WT組增大較明顯。
　　4.脂肪組織TG及TC含量：EKO及WTDM鼠脂肪組織TG含量較WT組明顯降低(P<0.05)，EKODM→WT組TG含量較EKODM→WTDM組有升高趨勢；EKO鼠脂肪組織TC含量顯著升高(P<0.05)，兩種供體脂肪TC含量無差異。
　　5.脂肪組織ApoE基因表達(dá)：EKODM→WT及EKODM→WTDM供體脂肪均顯著表達(dá)ApoE；WTDM組表達(dá)水平明顯低于WT

6、組(P<0.05)。
　　6.脂肪組織HSL基因表達(dá)：1)EKO小鼠較WT對照鼠HSL表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)；2) WTDM及EKODM小鼠脂肪組織HSL表達(dá)均明顯受抑；3) EKODM鼠HSL表達(dá)較WTDM鼠明顯減少(P<0.05)；4) EKODM-WT組較EKODM組HSL表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)，EKODM-WTDM組較EKODM有升高趨勢。
　　7.脂肪組織LPL基因表達(dá)：1) EKO較WT小鼠脂

7、肪組織LPL表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)；2) WTDM及EKODM小鼠脂肪組織LPL表達(dá)明顯受抑；3) EKODM-WT組及EKODM-WTDM組較EKODM組LPL表達(dá)水平明顯升高(P<0.05)。
　　8.脂肪組織FAS基因表達(dá)：1) EKODM組FAS表達(dá)較EKO、WT、WTDM組均有減少(P<0.05)；2) EKODM-WT組較EKODM組FAS表達(dá)水平有所升高(P<0.05)，但EKODM-WTDM組較EKODM

8、組無明顯變化(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.誘導(dǎo)糖尿病可明顯減少WT及EKO小鼠脂肪細(xì)胞體積；抑制脂肪組織ApoE、HSL、LPL及EKODM鼠FAS的表達(dá)，提示糖尿病小鼠脂肪細(xì)胞分化障礙。
　　2.EKODM小鼠白色脂肪組織供體移植至WT及WTDM鼠均明顯表達(dá)ApoE。
　　3.表達(dá)ApoE能夠促進(jìn)EKODM脂肪細(xì)胞在正常及糖尿病環(huán)境下HSL、LPL的表達(dá)及正常血糖環(huán)境下的FAS表達(dá)，明顯增大脂肪細(xì)胞體