牛外周血淋巴細胞對輸卵管上皮細胞和卵泡顆粒細胞凋亡及生長的影響.pdf

1、本試驗?zāi)康氖茄芯客庵苎馨图毎麑斅压苌掀ぜ毎吐雅蓊w粒細胞周期和凋亡的影響。將分離出的外周血淋巴細胞分別與等量純化后的輸卵管上皮細胞、卵泡顆粒細胞按照10：1、5：1、3：1、1：1不同比率接種于24孔培養(yǎng)板共培養(yǎng)4天，以單獨培養(yǎng)的輸卵管上皮細胞及卵泡顆粒細胞作為對照組。用倒置顯微鏡觀察輸卵管上皮細胞基本生長狀況；臺盼藍染色了解細胞成活率；細胞以碘化丙啶染色法處理，用流式細胞儀檢測輸卵管上皮細胞和卵泡顆粒細胞周期及凋亡情況。結(jié)果表明：

2、外周血淋巴細胞與輸卵管上皮細胞共培養(yǎng)時，對上皮細胞凋亡有促進作用，各個試驗組與對照組比較差異極顯著(P<0.01)。其中5：1組凋亡率最高，10：1組最低，3：1組與1：1組差異不顯著(P>0.05)，其它每兩組比較差異顯著(p<0.05)。表明外周血淋巴細胞與上皮細胞的比率決定其凋亡率；外周血淋巴細胞與顆粒細胞共培養(yǎng)時，抑制卵泡顆粒細胞的凋亡，其中10：1組和3：1組凋亡率明顯低于對照組，兩組表現(xiàn)出顯著性差異(P<0.05)，其中10

3、：1組與對照組差異極顯著(P<0.01)，而5：1組、1：1組和對照組相互無顯著性差異(P>0.05)。表明外周血淋巴細胞與顆粒細胞的比率決定其凋亡率。 為研究在共培養(yǎng)體系中加入PHA對輸卵管上皮細胞及卵泡顆粒細胞凋亡的影響，先進行了PHA對輸卵管上皮細胞和卵泡顆粒細胞生長和凋亡影響的研究。結(jié)果表明：培養(yǎng)基中加入PHA對卵泡顆粒細胞生長無顯著影響(P>0.05)，對其凋亡差異極顯著(P<0.01)；但試驗組S期比例高于對照組，表

4、現(xiàn)出顯著性差異(P<0.05)，推斷出PHA對上皮細胞增殖有促進作用。 介于外周血淋巴細胞與輸卵管上皮不同比率共培養(yǎng)的結(jié)果，用外周血淋巴細胞分別與第四代、第八代輸卵管上皮細胞以5：1的比率進行共培養(yǎng)4天，并在培養(yǎng)基中加入PHA，細胞以Hoechst 33342/PI染色法處理，用流式細胞儀檢測上皮細胞凋亡。用來說明共培養(yǎng)體系中加入PHA對輸卵管上皮細胞凋亡的影響。結(jié)果表明：不同代數(shù)的上皮細胞試驗組凋亡率接近于對照組。推測加入PH