鴨黃病毒滅活油乳苗的制備及免疫效力測定.pdf

1、鴨黃病毒病是由鴨黃病毒（DFV）引起的，是一種以種鴨、蛋鴨產(chǎn)蛋量下降為主要特征的急性、高度接觸性的傳染性疾病。自2010年該病爆發(fā)以來，給我國養(yǎng)鴨業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該病是一種新發(fā)傳染病，因此該病的致病性、流行病學(xué)特征以及防制工作等方面的研究尚在進(jìn)行中。為減少該病的危害，本試驗(yàn)從河南地區(qū)分離出鴨黃病毒毒株，并在此基礎(chǔ)上制備鴨黃病毒滅活油乳苗，然后對疫苗的免疫效力進(jìn)行分析，以期為鴨黃病毒病的防制工作提供一定的參考數(shù)據(jù)。主要試驗(yàn)內(nèi)容分為

2、以下三個(gè)方面：
　　1、鴨黃病毒的分離及鑒定
　　采集河南地區(qū)發(fā)病鴨廠的疑似鴨黃病毒感染病料，之后進(jìn)行病毒的鴨胚分離、生物學(xué)鑒定及 PCR鑒定。結(jié)果分離獲得1株鴨黃病毒毒株，基因測序結(jié)果與 Genbank上已公布鴨黃病毒毒株序列同源性達(dá)到95％以上，測得的 E囊膜蛋白的基因序列已提交 GenBank（JQ669731），該毒株的獲得也為下一步疫苗的制備奠定了基礎(chǔ)。
　　2、鴨黃病毒滅活油乳苗的制備及免疫效力分析

3、　　本試驗(yàn)應(yīng)用分離的鴨黃病毒，經(jīng)鴨胚增殖，測得病毒含量5×102.25 ELD50/mL，之后按照常規(guī)方法制備滅活油乳苗。將10日齡雛鴨分成4組，每組20只，分別免疫0.2 mL，0.5 mL，0.8 mL疫苗，以及PBS對照組。通過間接ELISA方法檢測鴨血清中抗體水平，結(jié)果顯示，在免疫后7至21 d內(nèi)，0.5 mL免疫組抗體水平與對照組相比差異極顯著（p<0.01）；免疫21 d時(shí)，E玫瑰花環(huán)試驗(yàn)檢測鴨血清中T淋巴細(xì)胞數(shù)量，結(jié)果為0

4、.5 mL組玫瑰花環(huán)形成率為（67.09±1.23）%，極顯著（p<0.01）于對照組（51.86±1.14）%；攻毒保護(hù)試驗(yàn)中0.2mL組免疫保護(hù)率為80%，0.5 mL和0.8 mL組疫苗保護(hù)率為100%，對照組發(fā)病鴨均表現(xiàn)出鴨黃病毒感染癥狀，其中3只死亡。因此，本試驗(yàn)制備的鴨黃病毒滅活油乳苗能夠提高鴨體內(nèi)的抗體和 T淋巴細(xì)胞水平，為進(jìn)一步研究鴨黃病毒疫苗提供了一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　3、鴨黃病毒滅活油乳苗的田間試驗(yàn)