多效應(yīng)穩(wěn)定劑構(gòu)筑小尺寸納米結(jié)晶給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、近年來，新發(fā)現(xiàn)的化學(xué)實(shí)體穩(wěn)定增加，40％以上新活性成分為難溶性化合物，這極大地增加了新藥開發(fā)的難度。此外，藥物的難溶性問題也造成每年有650億美元的臨床用藥損失。其中一些化合物可通過結(jié)構(gòu)改造--成鹽，成酯，改變分子結(jié)構(gòu)，超級粉碎，添加增溶劑，助溶劑等來增加其溶解性。但同時(shí)也帶來了毒副作用，劑型過大等副作用，加重了醫(yī)療事故。1990年，德國Muller R.H.提出了納米結(jié)晶通過提高溶解度和溶出速率來改善難溶性藥物的功效。然而，納米結(jié)晶的

2、物理穩(wěn)定性問題制約了該技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用。本研究主要內(nèi)容包括：
　?、挪捎梅慈軇?沉淀法制備DM納米混懸劑，以單因素實(shí)驗(yàn)方法考察處方工藝及凍干工藝，以星點(diǎn)設(shè)計(jì)效應(yīng)面法考察藥物及最佳多效應(yīng)穩(wěn)定劑的最佳濃度范圍。采用動態(tài)光散射法及掃描電子顯微鏡、原子力顯微鏡、透射電子顯微鏡對納米結(jié)晶的粒徑及形貌進(jìn)行考察、通過 X射線衍射儀和差示掃描量熱法對納米結(jié)晶的晶型及相變溫度進(jìn)行測定。采用紫外分光光度法進(jìn)行DM含量測定；采用漏槽法進(jìn)行DM納米結(jié)晶、

3、微米結(jié)晶及原料藥的溶解度及體外釋放實(shí)驗(yàn)。
　?、仆ㄟ^紅外光譜和核磁共振確定了多效應(yīng)穩(wěn)定劑的成功合成，并以粒徑分布、Zeta電位為指標(biāo)，以十二烷基硫酸鈉、泊洛沙姆407、聚乙烯吡咯烷酮k-30、羥丙基甲基纖維素為對照品，考察了多效應(yīng)穩(wěn)定劑的有效性及穩(wěn)定性。反溶劑-沉淀法操作簡單，易于控制，適合制備納米混懸劑。通過單因素實(shí)驗(yàn)和星點(diǎn)設(shè)計(jì)效應(yīng)面法確定了制備 DM的最佳制備工藝。以粒徑分布、Zeta電位及穩(wěn)定性為考察指標(biāo)，并最終確定在有機(jī)相

4、/水相為2:8，沉淀溫度為4℃，超聲時(shí)間為15 min，90/4K M PEGC濃度范圍為0.3-0.5 mg/mL，藥物濃度為20-30 mg/mL時(shí)制得的納米混懸劑最穩(wěn)定。在最佳條件下制備的納米混懸劑通過真空抽濾法除去有機(jī)溶劑，得到的晶體粒徑較小、電位穩(wěn)定，平均粒徑為265.9 nm，PI為0.105，Zeta電位為-26.6 mV。掃描電鏡結(jié)果顯示未經(jīng)處理的原料藥是無定形態(tài)，而由多效應(yīng)穩(wěn)定劑制備的納米混懸劑呈片狀。透射電鏡顯示由多

5、效應(yīng)穩(wěn)定劑制備的納米混懸劑都呈樹枝狀，但由90/4k M PEGC穩(wěn)定劑下的納米混懸劑分布最為均勻。原子力電子顯微鏡結(jié)果也表明90/4k M PEGC穩(wěn)定劑下的納米混懸劑分布最為均勻。因此，更加證明了多效應(yīng)穩(wěn)定劑的有效性，以及90/4k M PEGC在8種多效應(yīng)穩(wěn)定劑中的促穩(wěn)定性效果最好。
　?、菫榱诉M(jìn)一步提高DM納米結(jié)晶的穩(wěn)定性，對包括葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇在內(nèi)的糖類和多元醇類進(jìn)行真空冷凍干燥保護(hù)劑的篩選。以凍干品的

6、外觀形貌、復(fù)懸后的再分散性及穩(wěn)定性等為考察指標(biāo)，并最終確定甘露醇（最佳濃度范圍為3-5%(w/v)）為最佳凍干保護(hù)劑。凍干品的外觀為平滑的圓餅狀，復(fù)懸后的平均粒徑為290.4 nm，PI為0.240，并且在復(fù)懸后的10 h內(nèi)粒徑?jīng)]有明顯增長。透射電鏡結(jié)果顯示復(fù)懸后的DM納米結(jié)晶與新鮮制備的納米混懸劑無明顯差別，均呈樹枝狀均勻分布。X射線衍射測定結(jié)果表明DM納米結(jié)晶以結(jié)晶態(tài)存在，但其結(jié)晶度遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于原料藥。DSC測定結(jié)果顯示 DM納米結(jié)晶的

7、相變溫度降低。TG測定結(jié)果顯示DM納米結(jié)晶的失重比例增大。這些現(xiàn)象都表明納米結(jié)晶的粒徑減小，比表面積增大，溶出度增大，從而提高生物利用度。
　?、葹檫M(jìn)行納米結(jié)晶的體外效應(yīng)評價(jià)，進(jìn)行了溶解度和溶出速度的研究。在溶解度實(shí)驗(yàn)中，與原料藥相比,納米結(jié)晶制劑中的DM溶解度提高了175倍。溶出實(shí)驗(yàn)以pH1.2、7.5，水為溶出介質(zhì)，通過測定其吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求溶出度。分別為pH1.2時(shí)，40 min時(shí)的溶出度為100%，在介質(zhì)水中，4

8、0 min時(shí)的溶出度為84%，pH7.5時(shí)，40 min時(shí)的溶出度為99%。在3種不同的的介質(zhì)中，納米結(jié)晶的溶出度均高于微米晶體和原料藥。
　?、稍诠腆w制劑中，藥物的溶解度和溶出度、崩解度密切相關(guān)。藥物溶解度越大，崩解后顆粒周圍的液體能容納的藥物濃度就越大,溶出速度就越快。因此，提高難溶性藥物的生物利用度，不僅要提高溶解度，也要提高崩解度。在分散片的制備中，以崩解時(shí)限為指標(biāo)，通過星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法對包括羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙纖維

9、素、預(yù)膠化淀粉、交聯(lián)聚維酮在內(nèi)的崩解劑進(jìn)行兩兩組合篩選，結(jié)果表明在選取羧甲基淀粉鈉（濃度范圍為5.0-8.0%）和交聯(lián)聚維酮（濃度范圍為23.05-26.5%）時(shí)的崩解效果最好（崩解時(shí)間為31 s）。
　?、手苽淞硕嘈?yīng)穩(wěn)定劑，成功構(gòu)建了具有高穩(wěn)定性的DM納米混懸劑。以甘露醇為冷凍保護(hù)劑進(jìn)行冷凍干燥，DM的晶型保持不變，平均粒徑小，粒度分布均勻，溶解度和溶出度顯著增加。通過制備成分散片，使其具有較小崩解時(shí)限，有利于最大發(fā)揮其藥效。