骨髓沖洗去除對骨形成影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：骨的形成是一個(gè)多細(xì)胞，多因子參與的復(fù)雜過程，成骨細(xì)胞通過募集與進(jìn)一步分化，最終導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的積聚和礦化形成新骨，這一過程受到許多因素影響。目前在我國，人口老齡化已成為社會(huì)問題，隨之而來的因老年人骨質(zhì)疏松而導(dǎo)致的骨折將越來越多，如何有效的防治骨質(zhì)疏松、促進(jìn)骨的再生是一個(gè)有待解決的問題，具有很大的臨床意義。研究已發(fā)現(xiàn)骨髓在骨形成中起到了重要的作用，因其具有極強(qiáng)的再生性，對于相對短期內(nèi)評價(jià)活體內(nèi)骨形成和再吸收作用有很大的幫助

2、，就此國外已有學(xué)者對去除骨髓后成骨作用的增強(qiáng)作了報(bào)道，我們以此為依據(jù)設(shè)計(jì)了此實(shí)驗(yàn)，通過X線觀察平均灰度值(MGVs，Mean Gray Values)及進(jìn)行生物力學(xué)實(shí)驗(yàn)對骨髓去除后成骨反應(yīng)變化進(jìn)行了觀察與初步探討，為手術(shù)方法防治骨質(zhì)疏松做理論鋪墊。 方法：選用SD大鼠36只，均為雌性，月齡6月，重約300g，隨機(jī)分為兩組，每組18只，分別為生理鹽水沖洗組(NS組)與VitD3沖洗組(VD組)。采用氯胺酮100mg/kg腹腔內(nèi)注射

3、麻醉，無菌操作下采用膝前正中1cm縱切口，逐層暴露股骨髁間，利用1.0mm克氏針沿髓腔鉆孔。NS組左側(cè)股骨為實(shí)驗(yàn)側(cè)(EG側(cè))，髓腔以生理鹽水沖洗，右側(cè)為假實(shí)驗(yàn)側(cè)(Sham側(cè))，手術(shù)暴露股骨髁間僅于骨皮質(zhì)鉆孔，后全層縫合。VD組左側(cè)股骨為實(shí)驗(yàn)側(cè)(EG側(cè))，以VitD3沖洗髓腔，右側(cè)股骨髓腔為生理鹽水沖洗作為對照側(cè)(CG側(cè))。 將NS組與VD組各18只動(dòng)物隨機(jī)再分為三亞組，每組6只，分別于術(shù)后1、2、3周處死，采用相同動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法如

4、下：同一攝片條件下X線攝片，利用美國Adobe公司PhotoShop7.0進(jìn)行圖象分析，得到平均灰度值，因難免有誤差存在，故我們同時(shí)進(jìn)行了參照X線片上鉛字的灰度值將測得的灰度值進(jìn)行了校正，將校正后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。后將處死的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物剝離軟組織取出完整股骨，分為兩組(每組各3只)在力學(xué)實(shí)驗(yàn)機(jī)上用自制夾具固定后分別進(jìn)行扭轉(zhuǎn)、三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)得到最大扭矩及彎曲最大載荷，利用SPSS13.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出結(jié)論。 結(jié)果：全部動(dòng)物術(shù)

5、畢麻醉清醒后均恢復(fù)正常生理活動(dòng)自由攝食、飲水等，傷肢即能著地負(fù)重，36只動(dòng)物均存活至預(yù)定觀察時(shí)間，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程未發(fā)生傷口感染跡象，傷口愈合良好。 術(shù)后分別于1、2、3周麻醉藥物過量處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后采用同一條件X線攝片，進(jìn)行灰度平均值(MGVs)計(jì)算，結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析顯示第1周NS組大鼠左股骨EG側(cè)與Sham側(cè)X線所顯示灰度值有顯著性差異(P＜0.05)，第2周對比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，第3周EG側(cè)、Sham側(cè)數(shù)據(jù)分別為12

6、8.31±2.70、13 7.72±3.06，得到P值為0.007，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；VD組大鼠EG側(cè)與CG側(cè)第1、2、3周相對比均未出現(xiàn)顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 每一周處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后分組進(jìn)行三點(diǎn)彎曲與扭轉(zhuǎn)試驗(yàn)，后對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)得出NS組第1、2周最大載荷EG側(cè)與Sham側(cè)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，第三周統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)110.49±1.01、9 3.26±3.78做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P值0.038，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.

7、05)；扭轉(zhuǎn)試驗(yàn)最大扭矩第1、2、3周均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。VD組第1、2、3周所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析P值分別為0.886、0.343、0.098，未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)；扭轉(zhuǎn)試驗(yàn)中NS組與VD組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論：本試驗(yàn)于術(shù)后第3周灰度值及三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)最大載荷值得到提升，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明了大鼠股骨髓腔沖洗去除骨髓后骨質(zhì)增強(qiáng)的變化，表明了沖洗去除骨髓對成骨作用的積極影響：本試驗(yàn)