銀杏葉制劑的質(zhì)量評價.pdf

1、目的：建立銀杏葉制劑的HPLC指紋圖譜，對不同廠家銀杏葉制劑指紋特征相比較；建立高效液相色譜法測定銀杏葉制劑中4種黃酮類成分的含量，為銀杏葉制劑的質(zhì)量評價提供有效手段和依據(jù)。 方法： 1.銀杏葉制劑指紋圖譜研究 (1)提?。罕容^了不同提取方法、提取溶劑及提取時間的提取效果，選擇提取成分較多，提取率較高的提取條件。 (2)色譜條件：選用合適的色譜柱，調(diào)整流動相的組成、配比、流速，調(diào)節(jié)柱溫，選擇最佳的

2、色譜條件，使色譜圖符合指紋圖譜研究的要求。 (3)系統(tǒng)適用性試驗：在已確定的色譜條件下，考察指紋圖譜中參照物蘆丁峰的分離度和理論板數(shù)。 (4)精密度試驗：取同一份供試品溶液，重復(fù)進樣6次，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。 (5)重復(fù)性試驗：取同一批銀杏葉制劑6份，平行制備供試品溶液，分別進樣，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。 (6)穩(wěn)定性試驗：取同一

3、份供試品溶液分別于0、2、4、6、8、24h進樣，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。 (7)指紋圖譜的建立：分別取不同廠家的銀杏葉制劑22批進行指紋圖譜分析。 2.銀杏葉制劑化學(xué)成分含量測定研究 (1)提?。罕容^了不同提取方法、提取溶劑及提取時間的提取效果，選擇待測成分提取率較高的提取條件。 (2)色譜條件：選用合適的色譜柱，調(diào)整流動相的組成、配比、流速，使各待測成分色譜峰的分離度均

4、符合測定的要求。 (3)標準曲線的制備：配制一系列濃度的混合對照品溶液，測定峰面積；以峰面積為縱坐標，以濃度為橫坐標，繪制標準曲線，經(jīng)回歸處理得各標準曲線方程。 (4)檢測限試驗：將混合對照品溶液逐步稀釋，當信噪比S/N≥3時確定為檢測限。 (5)精密度試驗：取同一份樣品溶液，重復(fù)進樣6次，測定峰面積，計算儀器精密度； (6)重復(fù)性試驗：取同一樣品，精密稱取6份，制備溶液，進樣測定。 (7)穩(wěn)定性

5、試驗：取樣品溶液分別于0、2、4、6、8、24h進樣測定。 (8)回收率試驗：取已知含量的銀杏制劑6份，精密稱定，分別精密加入一定量的對照品，制備供試品溶液，進樣測定回收率。 (9)樣品測定：在上述色譜條件下，測定不同廠家銀杏葉制劑中各待測成分的含量。 結(jié)果： 1.銀杏葉制劑指紋圖譜研究 (1)提取：最佳提取條件為用75％甲醇超聲提取30min。 (2)色譜條件：采用C18色譜柱；乙腈-0

6、.05％磷酸為流動相進行梯度洗脫，流速為1mL·min-1，柱溫為30"C，進樣量為10μl。 (3)系統(tǒng)適用性試驗：按蘆丁峰計算理論板數(shù)約為4700，與其它色譜峰的分離度大于1.5。 (4)精密度試驗：以蘆丁峰為內(nèi)參比峰，計算各主要色譜峰相對保留時間和占總峰面積5％以上色譜峰的相對峰面積，其RSD分別為0.08％～0.89％和1.1％～2.0％，同時所得指紋圖譜相似度均高于0.97，符合指紋圖譜測定要求，精密度良好。

7、 (5)重復(fù)性試驗：各主要色譜峰相對保留時間和占總峰面積5％以上色譜峰的相對峰面積均無明顯變化，其RSD分別為0.10％～0.81％和1.0％～1.5％，同時所得指紋圖譜相似度均高于0.98，符合指紋圖譜測定要求，重復(fù)性良好。 (6)穩(wěn)定性試驗：各主要色譜峰相對保留時間及占總峰面積5％以上色譜峰的相對峰面積均無明顯變化，其RSD分別為0.11％～1.1％和1.2％～1.8％，同時所得指紋圖譜相似度均高于0.98，符合指紋圖

8、譜測定要求，穩(wěn)定性良好。 (7)指紋圖譜的建立：得到不同來源銀杏葉制劑的指紋圖譜。 2.銀杏葉制劑化學(xué)成分含量測定 (1)提?。和爸讣y圖譜”。 (2)色譜條件：同“指紋圖譜”。 (3)標準曲線的制備：各待測組分線性關(guān)系良好，r＞0.99。 (4)檢測限試驗：1-4的檢測限分別為0.015、0.011、0.023、0.017μg·ml-1。 (5)精密度試驗：方

9、法的精密度良好，其儀器RSD小于3％。 (6)重復(fù)性試驗：6份樣品的平均含量分別為2.194、0.1788、0.1358、0.1056mg/片，RSD分別為1.1％、1.2％、2.4％、2.2％，方法的重復(fù)性好。 (7)穩(wěn)定性試驗：供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定，1-4的RSD分別為0.77％、1.0％、1.7％、1.8％。 (8)回收率試驗：平均回收率在97％～99％之間，RSD均小于3％，方法的準確