脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白與心血管疾病的關(guān)聯(lián)及其分子調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)是協(xié)助脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝的脂肪因子，主要表達(dá)于脂肪組織和巨噬細(xì)胞。A-FABP參與炎癥反應(yīng)及糖脂代謝，在肥胖、2型糖尿病、代謝綜合征等代謝性疾病的發(fā)病中具有重要的作用。然而，A-FABP與心血管疾病的相關(guān)臨床研究及調(diào)控機(jī)制研究甚少。本課題通過四部分研究A-FABP與心血管疾病的關(guān)聯(lián)及其分子調(diào)控機(jī)制:
　　一、A-FABP與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(CAD)密切關(guān)聯(lián)
　　目的:明確血清A-

2、FABP水平在CAD患者中的變化情況，并闡明A-FABP水平與冠脈病變嚴(yán)重程度之間的聯(lián)系。
　　方法:檢測247例CAD患者（男性175例，女性72例）和94例非CAD對(duì)照受試者（男性46例，女性48例）的血清A-FABP濃度，所有受試者均經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影檢查明確診斷。分析A-FABP水平與人體測量參數(shù)、各項(xiàng)糖脂代謝指標(biāo)和冠脈病變嚴(yán)重程度的關(guān)系。
　　結(jié)果:CAD組血清A-FABP水平無論在男性還是女性均較非CAD組顯著升高（

3、男性P=0.029;女性P=0.031）。多支病變患者的血清A-FABP水平顯著高于非CAD受試者(男性P=0.011，女性P=0.004)，并且在校正年齡及性別之后與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)(CAI)呈顯著正相關(guān)(r=0.134，P=0.032)。多元logistic回歸顯示在女性血清A-FABP水平是CAD的獨(dú)立影響因素(OR=5.637，95％CI:1.299-24.457，P=0.021)。通過多元逐步回歸發(fā)現(xiàn)，血清A-FABP水平

4、與性別、腰圍、糖化血紅蛋白(HbA1c)、穩(wěn)態(tài)模式評(píng)估法的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)、低密度脂蛋白(LDL-C)及與反應(yīng)心功能不全的指標(biāo)N端前腦鈉肽(NT-proBNP)水平獨(dú)立正相關(guān)，與腎小球?yàn)V過率(GFR)獨(dú)立負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論:血清A-FABP水平與女性CAD的發(fā)病及嚴(yán)重程度密切相關(guān)，可能是CAD的獨(dú)立標(biāo)志物及預(yù)測因子。
　　二、2型糖尿病患者經(jīng)羅格列酮干預(yù)后血清A-FABP水平的變化
　　目的:PPARγ

5、激活是A-FABP表達(dá)的主要促進(jìn)因素之一，而羅格列酮作為PPARγ激動(dòng)劑其心血管風(fēng)險(xiǎn)已經(jīng)得到證實(shí)，但機(jī)制尚不清楚。本部分研究旨在明確血清A-FABP水平在羅格列酮干預(yù)后的變化情況，探討A-FABP在羅格列酮治療過程中對(duì)心功能影響的可能作用。
　　方法:對(duì)84例新診斷的2型糖尿病患者予以羅格列酮治療48周，隨訪血清A-FABP水平的變化，并分析其與心功能指標(biāo)—N端前腦鈉肽(NT-proBNP)水平的變化的關(guān)系。
　　結(jié)果:在治

6、療過程中血清A-FABP水平和NT-proBNP水平均顯著升高(P＜0.01)。血清A-FABP水平在基線與性別和腰圍呈正相關(guān)，在48周治療后與年齡、性別、腰圍、體重指數(shù)(BMI)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、LDL-C及NT-proBNP水平呈正相關(guān)(P＜0.05)。通過多元逐步回歸發(fā)現(xiàn)，治療前后A-FABP水平的變化值與NT-proBNP水平的變化值呈獨(dú)立正相關(guān)(β=0.320，P=0.007)。
　　結(jié)論:羅格列酮引

7、起的A-FABP水平的升高與NT-proBNP的升高密切相關(guān)，提示A-FABP可能介導(dǎo)了心臟與脂肪組織之間的器官對(duì)話。
　　三、A-FABP水平在充血性心力衰竭（心衰）患者中的變化及與心功能的關(guān)系目的:明確血清A-FABP水平在充血性心力衰竭患者中的變化情況，并闡明A-FABP水平與心衰嚴(yán)重程度之間的聯(lián)系。
　　方法:檢測252例心衰患者和261例年齡、性別及BMI匹配的非心衰受試者的血清A-FABP濃度。分析A-FABP水

8、平與糖脂代謝等生化指標(biāo)、各項(xiàng)心超參數(shù)、NT-proBNP水平及心衰嚴(yán)重程度的關(guān)系。
　　結(jié)果:心衰患者的血清A-FABP水平[11.17(6.63-19.93)ng/ml]顯著高于非心衰者[5.67(3.20-8.87)ng/ml](P＜0.001)，并隨紐約心臟病協(xié)會(huì)心功能分級(jí)(NYHA)的加重而明顯升高(P＜0.001)。通過多元逐步回歸發(fā)現(xiàn)，NT-proBNP水平及各項(xiàng)心超參數(shù)（如左室射血分?jǐn)?shù)）均與血清A-FABP水平呈獨(dú)立

9、相關(guān)。通過多元logistic回歸發(fā)現(xiàn)，A-FABP水平是心衰的獨(dú)立影響因素(OR=6.93，95％CI:2.49-19.30，P＜0.001)。
　　結(jié)論:心衰患者的血清A-FABP水平顯著升高，與心臟收縮功能參數(shù)呈正相關(guān)，且是心衰的獨(dú)立影響因素。A-FABP在心功能不全的發(fā)病中起重要作用。
　　四、A-FABP與糖尿病心肌病的關(guān)聯(lián)及在糖尿病心肌病和心肌缺血/再灌注損傷中的作用機(jī)制
　　（一）A-FABP與早期糖尿病

10、心肌病的相關(guān)性
　　目的:明確A-FABP與糖尿病心肌病早期階段—無癥狀左室舒張功能不全的關(guān)系。
　　方法:共280例2型糖尿病患者（男性131例，女性149例，平均年齡63.8±12.3歲）納入本研究，其中包括經(jīng)心超診斷的156例單純舒張功能不全患者，及124例舒張功能正常的對(duì)照受試者。測定所有受試者血清A-FABP水平及糖脂代謝等生化參數(shù)。
　　結(jié)果:血清A-FABP水平在舒張功能不全患者顯著高于對(duì)照者(P=0.0

11、01)。A-FABP水平不僅與心功能的血清學(xué)指標(biāo)NT-proBNP水平呈顯著正相關(guān)，還與心超測定的心室舒張功能參數(shù)左心房內(nèi)徑(LAD)、舒張末期室間隔厚度(IVST)及舒張?jiān)缙谂c晚期峰值流速之比(E/A)顯著相關(guān)（P值均＜0.05）。此外，多元logistic回歸分析顯示在校正年齡、性別、BMI、hsCRP及NT-proBNP后，高水平的A-FABP是左心室舒張功能不全的獨(dú)立影響因素(OR=2.44，95％CI:1.06-5.67，P=

12、0.037)。
　　結(jié)論:A-FABP與糖尿病左室舒張功能不全獨(dú)立相關(guān)，提示A-FABP可能是早期糖尿病心肌病的一個(gè)重要的血清學(xué)標(biāo)志物。
　　（二）A-FABP在糖尿病心肌病和心肌缺血/再灌注損傷中的作用機(jī)制
　　目的:研究A-FABP在糖尿病心肌病及心肌缺血再灌注損傷中的作用并解析其機(jī)制。
　　方法:同窩出生的野生型(WT)小鼠和A-FABP基因敲除(KO)小鼠經(jīng)小劑量鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)糖尿病，6周后行急

13、性心肌缺血再灌注手術(shù)，假手術(shù)組做對(duì)照。比較WT與A-FABPKO小鼠心功能、心肌梗死面積、心肌細(xì)胞凋亡及氧化應(yīng)激水平的差異。通過免疫組化、蛋白免疫印跡技術(shù)(Westernblot)等方法研究A-FABP介導(dǎo)糖尿病心肌病及心肌缺血/再灌注損傷的機(jī)制。
　　結(jié)果:心肌組織A-FABP表達(dá)水平和血清A-FABP水平在糖尿病和心肌缺血再灌注后均明顯升高。A-FABP基因缺失可保護(hù)糖尿病和缺血/再灌注后引起的心肌損傷，表現(xiàn)為心功能受損減少、

14、梗死面積降低、心肌細(xì)胞凋亡減少及心肌的氧化應(yīng)激水平降低。A-FABP表達(dá)于心肌內(nèi)皮細(xì)胞，WT小鼠在發(fā)生糖尿病及心肌缺血/再灌注損傷后心肌內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)的磷酸化水平顯著降低，而A-FABPKO小鼠則顯著升高。此外，A-FABPKO小鼠在MI/R后心肌NO的產(chǎn)生量顯著高于WT小鼠。
　　結(jié)論:A-FABP通過抑制心肌內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)的磷酸化及一氧化氮(NO)的產(chǎn)生而介導(dǎo)糖尿病心肌病及心肌缺血/再灌注損傷。