攜帶blaNDM-1基因肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：討攜帶NDM-1基因肺炎克雷伯菌耐藥機制、分子生物學特性和blaNDM基因的轉移和傳播機制。
　　方法：使用VITEK-32全自動細菌分析儀進行菌種鑒定，紙片擴散法測定菌株對抗生藥物的敏感性，用E-test方法重新測定細菌對各類抗菌藥物的最低抑菌濃度(MIC)。改良Hodge試驗進行碳青霉烯酶表型的篩選;三維試驗檢測AmpC酶;EDTA-Etest試紙條協(xié)同試驗檢測金屬酶;用PCR擴增TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-

2、M-9、KPC-1、KPC-2、GES、IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2、SPM-1、DHA、CMY、ompK35、ompK36和NDM-1基因，并對陽性基因進行測序分析確定其基因型;用脈沖場凝膠電泳和多位點序列分型分析細菌的同源性;質粒接合試驗和轉化試驗驗證NDM-1基因是否位于質粒上。
　　結果：2011年1月-2012年6月共收集到27株耐碳青霉烯類抗生素的肺炎克雷伯菌，發(fā)現(xiàn)2株肺炎克雷伯菌攜帶有NDM-1基因

3、。其中肺炎克雷伯菌KP12還同時攜帶有SHV-1基因;肺炎克雷伯菌KP18同時攜帶有TEM-1、SHV-12和CTX-M-14基因，以及還攜帶有氨基糖苷類抗菌藥物16S rRNA甲基化酶armA基因。肺炎克雷伯菌KP12和KP18多位點序列分型分別為ST15和新序列型ST1031。脈沖場凝膠電泳顯示2株細菌為不同克隆型。接合試驗顯示肺炎克雷伯菌KP12接合成功，而肺炎克雷伯菌KP18未接合成功。2株細菌耐藥質粒經轉化試驗均成功轉入至大腸

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