大鼠急性心肌缺血再灌注損傷與解偶聯(lián)蛋白2表達(dá)的關(guān)系.pdf

1、目的：急性心肌缺血再灌注可引起心肌細(xì)胞線(xiàn)粒體內(nèi)活性氧增加并造成一系列損傷：脂質(zhì)過(guò)氧化、DNA損傷、細(xì)胞凋亡等等。近來(lái)研究表明：解偶聯(lián)蛋白2(UCP<,2>)廣泛存在于組織細(xì)胞的線(xiàn)粒體內(nèi)膜，具有抑制活性氧產(chǎn)生的功能。本實(shí)驗(yàn)旨在探討急性缺血再灌注后心肌細(xì)胞線(xiàn)粒體內(nèi)膜解偶聯(lián)蛋白2表達(dá)的變化。 材料和方法：24只SD大鼠隨機(jī)分成3組(n=8)：①假手術(shù)組(Sham組)；②缺血再灌注后2小時(shí)組(2h組)；③缺血再灌注后6小時(shí)(6h組)。采

2、用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支的方法造成大鼠心肌急性缺血，30 min后再通實(shí)行再灌注，分別于再灌注后2 h、6 h處死大鼠，用預(yù)冷的PBS洗凈殘血，分別用4％多聚甲醛固定及存放于-80℃冰箱收集各組大鼠心肌標(biāo)本，用免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)免疫印跡(western Blotting)的方法檢測(cè)各組心肌中解偶聯(lián)蛋白2．的表達(dá)。 結(jié)果：(1)結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈前降支后心電圖可見(jiàn)ST-T改變。(2)假手術(shù)組心肌切片經(jīng)免疫組織化學(xué)染色細(xì)胞漿中未見(jiàn)UCP

3、<,2>表達(dá)，而缺血再灌注后2h、6h組心肌切片經(jīng)免疫組織化學(xué)染色可見(jiàn)細(xì)胞漿中棕黃色顆粒，UCP<,2>陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增多。(3)各組心肌細(xì)胞線(xiàn)粒體提取蛋白質(zhì)后，經(jīng)western Blotting檢測(cè)均可見(jiàn)UCP<,2>陽(yáng)性蛋白雜交條帶，對(duì)各組條帶平均相對(duì)光密度進(jìn)行定量分析，結(jié)果表明：缺血再灌注后線(xiàn)粒體的LJCP<,2>表達(dá)增高，與假手術(shù)組相比具有明顯差別(p<0.01)；6h組比2h組表達(dá)高(p(0.01)，差別明顯。 結(jié)論：