土茯苓化學(xué)對照品及質(zhì)量綜合評價研究.pdf

1、土茯苓為百合科植物光葉菝葜(Smilax glabra Roxb.)的干燥根莖。有除濕，解毒，通利關(guān)節(jié)之功效。臨床用于濕熱淋濁，帶下，癰腫，瘰疬，疥癬，梅毒及汞中毒所致的肢體拘攣，筋骨疼痛。本論文對其進(jìn)行了化學(xué)成分、化學(xué)對照品、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及藥理作用四個方面的研究。 土茯苓藥材化學(xué)成分研究。從土茯苓中分離得到20個化合物，經(jīng)IR、UV、MS、<'1>H-NMR、<'13>CNMR、HMBC、HSQC、DEPT等手段及化學(xué)方法鑒定出1

2、7個化合物。它們分別為槲皮素、落新婦苷、白藜蘆醇、β-谷甾醇、豆甾醇、(-)表兒茶素、柚皮素、莽草酸、琥珀酸、阿魏酸、胡蘿卜苷、花旗松素、棕櫚酸、5-O-咖啡酰莽草酸、5-羥甲基糠醛、木蠟酸、尼克酰胺，其中木蠟酸為首次從該植物中分離得到。采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)對土茯苓揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，鑒定出21個化合物，主要為芳香族化合物。 土茯苓化學(xué)對照品研究。通過優(yōu)化提取分離條件，建立了落新婦苷化學(xué)對照品的制備工藝，該工

3、藝能大量、快速地獲得落新婦苷，并且建立了該對照品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。共累積得到2g(純度≥98％)以上的落新婦苷對照品。 土茯苓藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。以總黃酮含量為指標(biāo)，采用正交試驗設(shè)計，對乙醇濃度、溶劑用量、提取時間3因素進(jìn)行優(yōu)化，確定了土茯苓總黃酮提取工藝。建立了土茯苓中總黃酮的定量分析方法，證明了選擇落新婦苷作為土茯苓總黃酮含量測定對照品的合理性和科學(xué)性。采用高效液相色譜法同時測定10批不同來源的土茯苓藥材中落新婦苷和白藜蘆醇的含量。

4、對10批不同來源的土茯苓藥材進(jìn)行了HPLC指紋圖譜分析，相似度結(jié)果較好(相似度大于0.900)，確定了10個共有峰，并用HPLC．MS和HPLC-<'1>H NMR法對部分特征峰進(jìn)行指認(rèn)。采用指紋圖譜方法鑒別了土茯苓正品及其常見的3種混淆品。 對土茯苓4個提取部位以及化合物落新婦苷進(jìn)行了抗菌、抗氧化、抗乙肝病毒、抗SIVmac251病毒和抗腫瘤的實驗研究。結(jié)果表明，土茯苓乙酸乙酯部位對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、志賀氏痢

5、疾桿菌均有抑制作用；土茯苓水煎液和落新婦苷對這5種菌均沒有抑制作用。土茯苓各提取部位以及落新婦苷均有較好的抗自由基活性；對乙肝病毒以及HepG2細(xì)胞都沒有抑制作用。此外，土茯苓乙醇提取物對Hela，細(xì)胞表現(xiàn)出一定的抑制作用；土茯苓乙醇提取物以及正丁醇部位對SIVmac251病毒有一定的抑制作用。上述研究結(jié)果為土茯苓的質(zhì)量評價提供了科學(xué)依據(jù)；為評價土茯苓整體功效與上述各藥理指標(biāo)之間的關(guān)聯(lián)關(guān)系，應(yīng)用貝葉斯網(wǎng)絡(luò)對其清熱解毒作用進(jìn)行預(yù)測，進(jìn)一步