玳玳花瓣脂氫過(guò)氧化物裂解酶基因cDNA全長(zhǎng)的克隆.pdf

1、玳玳(Citrus aurautium)為蕓香科柑橘屬酸橙的變種，是原產(chǎn)我國(guó)的重要木本香花，其花香氣濃郁，可供窨制花茶、香精提取和入藥，具有較高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 本研究以玳玳花瓣為材料，采用RT-PCR和RACE技術(shù)，克隆了玳玳HPL基因cDNA全長(zhǎng)，并對(duì)其原核表達(dá)和基因組進(jìn)行研究，為下一步利用HPL基因cDNA進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化研究奠定基礎(chǔ)，希望為花卉香味的遺傳改良提供一條新途徑。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1、采用RT-PC

2、R和RACE技術(shù)克隆了玳玳HPL基因cDNA全長(zhǎng) 玳玳HPL基因cDNA全長(zhǎng)為1776bp，其中包含52bp的5′非編碼區(qū)，224bp的3′非編碼區(qū)，1500bp的編碼區(qū)(編碼499個(gè)氨基酸，分子量為55.7 kDa)。玳玳HPL基因cDNA編碼的氨基酸序列中包含了HPL的四個(gè)保守區(qū)域。經(jīng)推斷，玳玳HPL為親水性多肽，將該HPL基因cDNA編碼區(qū)的核苷酸序列及所推導(dǎo)的氨基酸序列與其它植物HPL基因cDNA進(jìn)行比較，結(jié)果表明，玳玳

3、HPL基因cDNA編碼區(qū)與蕓香科中的甜橙和粗檸檬序列一致性最高，分別達(dá)99％和98％，與黃瓜和甜瓜的一致性最低，分別為33.3％和33.2％。將氨基酸序列的分析結(jié)果繪成進(jìn)化樹(shù)，從進(jìn)化樹(shù)可以看出，玳玳花瓣HPL與粗檸檬、甜橙、紫花苜蓿、番茄、馬鈴薯、甜椒、煙草、番石榴、擬南芥的13-HPL聚成一類。由此，可以推斷玳玳花瓣HPL屬于13-HPL類。 2、玳玳HPL基因cDNA的原核表達(dá) 將分離出來(lái)的玳玳HPL基因cDNA的編