紫外誘變及不同菌株混合培養(yǎng)對(duì)瘤胃真菌產(chǎn)纖維素酶活性的影響.pdf

1、EffectsofWInducedMutationandDifferentCombinatiOIlSofFourStrainsIsolatedfromRumenFungionCellulases1^1■●●●1一』J●上，rocIUCnonZ托VZ臼鑼■ermentanonThesissubmittedt01laeslsSUbmlttetoO@ngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRe

2、quirementfortheDegreeof—MasterOfAgronomy1一一ZhouGuangming(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine)Supervisor：WangLihuaQingdaoChinaJurte，20t3青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要紫外誘變及菌株混合培養(yǎng)對(duì)瘤胃真菌產(chǎn)纖維素酶活性的影響摘要本研究通過(guò)體外發(fā)酵試驗(yàn)，利用從嶗山奶山羊瘤胃內(nèi)液中分離純化的四株真菌為

3、菌種，研究紫外誘變對(duì)瘤胃真茵產(chǎn)纖維素酶的影響，并得到酶活最高的誘變菌株。并對(duì)四株瘤胃真菌按不同的組合(c：、c：、c：、c：)進(jìn)行等比例混合，研究不同菌株體外混合培養(yǎng)對(duì)其產(chǎn)纖維素降解酶活性的影響，并得到最佳混合培養(yǎng)組合。用最佳混合培養(yǎng)組合進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，經(jīng)硫酸銨鹽析法得到粗酶制劑，并對(duì)所得粗酶制劑的體外作用條件進(jìn)行研究，得到體外最佳作用條件和最適添加量，最后在此條件下對(duì)瘤胃真菌所產(chǎn)纖維素酶的實(shí)際應(yīng)用效果進(jìn)行評(píng)估。整個(gè)試驗(yàn)分為三部分。1試驗(yàn)

4、1利用20w紫外線燈距離20cm對(duì)A、B、C、D四個(gè)瘤胃真菌菌株進(jìn)行30S、60S、90S照射處理，研究紫外誘變最佳誘變劑量及對(duì)其產(chǎn)酶活性的影響。試驗(yàn)表明20w紫外燈、距離20cm、照射時(shí)間90S即可達(dá)到最佳誘變作用。但是，在本試驗(yàn)過(guò)程中未出現(xiàn)可穩(wěn)定遺傳的正向突變。2試驗(yàn)2采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究A、B、C、D四種不同瘤胃真菌單菌株及其混合培養(yǎng)對(duì)瘤胃真菌產(chǎn)纖維素降解酶(羧甲基纖維素酶、微晶纖維素酶、B葡萄糖苷酶、木聚糖酶與果膠酶)活性的

5、影響。結(jié)果表明，瘤胃真菌B菌株羧甲基纖維素酶、微晶纖維素酶、p葡萄糖苷酶和果膠酶的72h酶活分別為266U／ml、398U／ml、233U／ml和150U／ml，其中前三種酶的酶活顯著高于其他三株瘤胃真菌(PO05)；瘤胃真菌A菌株的72h木聚糖酶活達(dá)857U／ml，顯著高于其他各組(P005)。而AC組果膠酶的72h酶活最高，達(dá)到306U／ml，顯著高于其他各組(P005)。綜合各酶活表現(xiàn)，AB組合為產(chǎn)纖維素降解酶最佳組合。3試驗(yàn)3采