Egr-1啟動(dòng)子放射誘導(dǎo)調(diào)控Bax基因表達(dá)的研究.pdf

1、　　 當(dāng)細(xì)胞受到輻射時(shí)，某些編碼轉(zhuǎn)錄因子的短暫早期基因被激活。這些被激活的基因包括早期生長反應(yīng)因子基因家族。這些基因可感受X射線產(chǎn)生的氧自由基的誘導(dǎo)而引起細(xì)胞的反應(yīng)。以前的研究證明Egr-1被輻射誘導(dǎo)是由Egr-1啟動(dòng)子區(qū)所含的6個(gè)CC(A+Trich)6GG(CArG)模體介導(dǎo)。我們可以利用這個(gè)放射誘導(dǎo)啟動(dòng)子來控制腫瘤組織內(nèi)的Bax的表達(dá)。構(gòu)建一個(gè)由Egr-1啟動(dòng)子上游連接BaxcDNA的質(zhì)粒，它可以在受到輻射后被激活而引起B(yǎng)ax表達(dá)

2、，從而提高放射誘導(dǎo)凋亡?！　gr-1啟動(dòng)子和BaxαcDNA的制備：為了構(gòu)建放射誘導(dǎo)基因表達(dá)系統(tǒng)，從BALB/c小鼠的基因組中提取Egr-1啟動(dòng)子的基因序列。通過RT-PCR，從乳腺癌細(xì)胞中提取Baxα基因序列?！　Egr-Bax表達(dá)載體的構(gòu)建和鑒定：為了研究放射誘導(dǎo)Bax基因表達(dá)的可能性，構(gòu)建了一個(gè)pEgr-Bax表達(dá)載體。當(dāng)它受到輻射時(shí)可提高Bax基因的表達(dá)。從pIRES-EGFP質(zhì)粒中剔除CMV，代之為Egr-1啟動(dòng)子。然