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文檔簡介
1、目的:觀察瘦素在體外對人脂肪細(xì)胞分解代謝的急性及慢性影響,探討瘦素對脂肪細(xì)胞脂肪蓄積的調(diào)節(jié)作用。 方法:取成人皮下脂肪組織,常規(guī)提取和培養(yǎng)前脂肪細(xì)胞,待細(xì)胞融合后誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞,光鏡下觀察并經(jīng)油紅0染色證實(shí)后,把成熟脂肪細(xì)胞隨機(jī)分為四組:正常對照組、低濃度組、中濃度組和高濃度組,分別培養(yǎng)于含瘦素濃度為0ng/ml、l0ng/ml、l00ng/ml、1000ng/ml的培養(yǎng)液a中。分別在培養(yǎng)4h、48h、72h時(shí)收集培養(yǎng)液檢測
2、游離脂肪酸和甘油的濃度,取脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅0染色后測定脂肪細(xì)胞中脂肪顆粒的積分光密度。對各組參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析以觀察瘦素對成人脂肪細(xì)胞分解代謝的急性以及慢性影響。 結(jié)果:1、瘦素作用4h后,與對照組相比,高濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油的濃度分別增加約312%(P<0.01)和17%(P<0.01),脂肪顆粒積分光密度減少約35%(P<0.01);低濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油濃度分別增加約87%(P<0.05)和5%(P<0.
3、05),脂肪顆粒積分光密度減少約12%(P<0.05);中濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油濃度分別增加約181%(P<0.05)和8%(P<0.05),脂肪顆粒積分光密度減少約21%(P<0.05)。游離脂肪酸和甘油濃度與瘦素濃度正相關(guān),脂肪顆粒積分光密度與瘦素濃度呈負(fù)相關(guān)。 2、作用48h后,中濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油的濃度與對照組比較分別增加約334%(P<0.01)和31%(P<0.01),細(xì)胞中脂肪顆粒的積分光密度減
4、少約46%(P<0.01);低濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油的濃度分別增加約94%(P<0.05)和16%(P<0.05),脂肪顆粒積分光密度減少約18%(P<0.05);高濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油的濃度分別增加約252%和22%(P<0.05),脂肪顆粒積分光密度減少約31%(P<0.05)。游離脂肪酸和甘油濃度、脂肪顆粒積分光密度與瘦素濃度無相關(guān)性。 3、作用72h后時(shí)觀察到,與對照組比較,中濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和
5、甘油的濃度與對照組比較分別增加約382%(P<0.01)和36%(P<0.01),細(xì)胞中脂肪顆粒的積分光密度減少約49%(P<0.01);低濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油的濃度分別增加約103%(P<0.05)和13%(P<0.05),脂肪顆粒積分光密度減少約19%(P<0.015);高濃度組培養(yǎng)液中游離脂肪酸和甘油的濃度分別增加約259%(P<0.05)和24%(P<0.05),脂肪顆粒積分光密度減少約43%(P<0.05)。游離脂肪
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