表達(dá)ALK蛋白的大B細(xì)胞淋巴瘤的臨床病理、免疫表型及基因重排研究.pdf

1、［背景和目的］ 從1997年至2005年國外文獻(xiàn)共報道27例DLBCI表達(dá)間變性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）蛋白，并檢測到CLTC-ALK和NPM-ALK易位。腫瘤細(xì)胞形態(tài)及免疫表型特點對應(yīng)正常B細(xì)胞分化過程的晚期和成熟為漿細(xì)胞的階段，提示ALK蛋白表達(dá)易出現(xiàn)在具有免疫功能的B細(xì)胞。因此本研究在大B細(xì)胞淋巴瘤中納入DLBCL和對應(yīng)正常B細(xì)胞分化過程末期的髓外漿細(xì)胞瘤作為研究樣本，使用ALK多

2、克隆抗體對其進(jìn)行篩查。對ALK陽性病例進(jìn)行病理形態(tài)、免疫表型、基因重排和臨床隨訪研究，了解這一罕見B細(xì)胞腫瘤的發(fā)病情況、臨床病理特點和診斷及鑒別診斷要點。 ［材料和方法］ 根據(jù)2001年WHO淋巴造血組織腫瘤分類收集四川大學(xué)華西醫(yī)院病理科952例DLBCL和46例髓外漿細(xì)胞瘤，以LsAB法作ALK-11染色。對陽性病例再用EnVision法作ALK-11染色，僅EnVision法陽性病例為最終納入病例。對納入病例用EnVisio

3、n法加做磷酸化ALK、CD20、CD3、CD30、EMA、PC、Ki-67、、粒酶B和TIA-1等免疫表型，進(jìn)行IgH基因重排檢測并收集隨訪資料。 ［結(jié)果] 1．LsAB法952例DLBCL中有32例表達(dá)ALK蛋白（3.4％），46例髓外漿細(xì)胞瘤中3例檢測到ALK蛋白（6.5％）。EnVision染色后僅7例DLBCL和1例漿細(xì)胞瘤表達(dá)ALK蛋白（0.8％）。2．8例大B細(xì)胞淋巴瘤中男性6例，女性2例，年齡24～80歲，中位年

4、齡47.5歲，平均年齡53.8歲。5例為淋巴結(jié)原發(fā)，2例為消化道原發(fā)，1例原發(fā)于上呼吸道。臨床分期Ⅰ期和Ⅲ期各2例、Ⅱ期3例、Ⅳ期1例，4例病人伴有B癥狀。隨訪時間最長32月，最短2月。隨訪截止時死亡6例，死亡病例最長存活時間32月。組織學(xué)：免疫母細(xì)胞性伴漿樣分化和間變性各1例、中心母細(xì)胞性2例、漿母細(xì)胞性3例和漿細(xì)胞瘤1例。免疫表型：免疫母細(xì)胞性、間變性和中心母細(xì)胞性DLBCL都表達(dá)CD20，ALK蛋白陽性模式分別為胞膜和胞漿陽性、胞

5、漿顆粒狀陽性和胞漿陽性。4例都不表達(dá)磷酸化ALK蛋白。3例漿母細(xì)胞性DLBCL和1例漿細(xì)胞瘤都不表達(dá)CD20，但都表達(dá)磷酸化ALK蛋白。3例漿母細(xì)胞性DLBCL中2例為CD79a、CD30、EMA和PC陽性，其中1例ALK蛋白和磷酸化ALK蛋白同為胞漿陽性，另1例ALK蛋白和磷酸化ALK蛋白同為胞漿顆粒狀陽性。另1例漿母細(xì)胞性DLBCL僅LCA陽性和K輕鏈限制性表達(dá)，CD79a、CD30、EMA和PC均為陰性，ALK染色為胞核和胞漿陽性

6、，磷酸化ALK蛋白為胞漿陽性。1例漿細(xì)胞瘤的瘤細(xì)胞為PC和EMA陽性，K輕鏈限制性表達(dá)，CD20、CD79a、CD30陰性。ALK蛋白和磷酸化ALK蛋白都呈胞漿內(nèi)顆粒狀陽性。8例病例IgH基因重排都檢測到克隆性增生。 ［結(jié)論］ 1．LsAB方法檢測ALK蛋白由于內(nèi)源性生物素的存在，導(dǎo)致假陽性率太高（77％），應(yīng)盡量使用EnVision方法。2．在ALK蛋白陽性的基礎(chǔ)上，采用磷酸化ALK蛋白染色可進(jìn)一步檢測是否存在活化ALK蛋白