打破碗花花的活性成分研究.pdf

1、毛茛科(Ranunculaceae)銀蓮花屬(Anemone)植物主要含有三萜皂苷類成分，藥理研究證明具有抗腫瘤、抗炎、抑菌等作用。打破碗花花(Anemone hupehensis Lem.)作為該屬植物，主要分布于西南部高山地區(qū)，已報道從四川、安徽等產(chǎn)地的該植物中分離得到13個三萜皂苷，尚未進行活性研究。該植物在我國陜西省漢中、商南、安康等地資源豐富，但到目前為止，對產(chǎn)自陜西的打破碗花花尚無化學(xué)成分研究報道。本課題首次對采自陜西安康市

2、的打破碗花花的根莖開展了化學(xué)和抗腫瘤活性研究，以期發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地該植物成分的差異，闡明陜西產(chǎn)地打破碗花花的化學(xué)成分，并為其開發(fā)利用提供理論和實驗基礎(chǔ)。
　　本文利用反復(fù)硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、反相ODS柱色譜及制備型HPLC等方法對打破碗花花(Anemone hupehensis Lem.)根莖70％乙醇提取物進行分離，得到27個化合物，并通過化合物理化性質(zhì)及波譜學(xué)特征解析其化學(xué)結(jié)構(gòu)，包含11個三萜皂苷類化合

3、物，分別鑒定為 cauloside D(8)，huzhangoside D(9),3-O-β-D-xylopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl oleanolic acid(10)，hederasaponin B(11)，huzhangoside

4、B(12)，huzhangoside C(13)，hederacolchiside F(14)，clematiganoside A(15)，hederacolchiside E(16),3-O-β-D-ribopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl hederagenin28-O-α-L-rham-

5、nopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(17),3-O-β-D-xyl-opyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl oleanolic acid28-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-g

6、lucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(18);11個新木脂素苷類化合物，分別鑒定為(7R,8S)-guaiacylglycerol-8-O-4′-sinapyl ether9′-O-β-D-glucopyranoside(1),(7R,8S)-dihydrode-hydrodiconiferyl alcohol9′-O-β-D-glucopyranoside(2),(7R,8S)-1-(4-hy

7、droxy-3-methox-yphenyl)-2-[4-(3-β-D-glucopyranoxypropyl)-2,6-dimethoxyphenoxy]-1,3-propanediol(3),(7R,8R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol9′-O-β-D-glucopyranoside(4),(7R,8S)-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-[4-(3-β-D-glu

8、copyranoxypropyl)-2-methoxyphenoxy]-1,3-propanediol(19),(7R,8R)-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-[4-(3-β-D-glucopyranoxy propyl)-2-methoxyphenoxyl]-1,3-propanediol(20),(7S,8R) guaiacylglycerol-8-O-4′-sina-pyl ether9′-O-β-

9、D-glucopyranoside(21),(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol9′-O-β-D-glucopyranoside(22),(R)-2-[5-(4-β-D-glucopyranose)-3-methoxyphenoxypropy l]-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenoxyl)-propanol(24),(S)-2-[5-(3-β-D-glucopyrano

10、xypropy l)-4-hydroxy-3-methoxyphenoxyl]-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenoxyl)-propanol(25),(7S,8S)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol9-O-β-D-glucopyranoside(26);3個簡單苯丙素苷類化合物，分別鑒定為(S)-1-O-(β-D-glucopyranosyl)-2-[2-methoxy-4-hydr

11、oxypropyl--phenoxyl]-propan-3-ol(5),(S)-1-O-(β-D-glucopyranosyl)-2-{2-methoxy-4-[1-propen-3-o l]-phenoxyl}-propan-3-ol(6),(R)-1-O-(β-D-glucopyranosyl)-2-[2-methoxy-4-hydroxypro pyl-phenoxyl]-propan-3-ol(7),1個酚苷為4-hydroxy

12、-2-methoxyphenyl-β-D-glucopyra noside(23);1個芳酸酯類成分為dibutylphthalate(27)。除化合物9和12外其余25個化合物均為首次從該植物中分離得到，其中化合物1,2,3,6,19和25為6個新化合物，簡單苯丙素苷及新木脂素苷類成分為首次在銀蓮花屬植物中發(fā)現(xiàn)。
　　初步的藥理活性篩選表明：四個皂苷類化合物中，單糖鏈皂苷10對Hep-G2細胞及U-87MG細胞表現(xiàn)出較為顯著的細

13、胞毒性IC50分別為3.67μM及2.98μM，對其余皂苷類化合物未表現(xiàn)出細胞毒性；七個新木脂素苷類化合物中，化合物3及化合24對Hep-G2細胞表現(xiàn)出一定細胞毒性，對U-87MG細胞表現(xiàn)出邊緣毒性，化合物19及化合物26對Hep-G2細胞表現(xiàn)出一定的邊緣細胞毒性；兩個簡單苯丙素類化合物5與6未顯示細胞毒性。
　　課題創(chuàng)新性及研究意義：
　　(1)首次對陜西產(chǎn)地的打破碗花花進行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，分離鑒定了27個單體化合物

14、，包含11個三萜皂苷、11個新木脂素苷、3個簡單苯丙素苷、1個酚苷和1個芳酸酯類成分。
　　(2)發(fā)現(xiàn)了6個新化合物，均為已知苯丙素苷的立體異構(gòu)體；另有10個化合物為首次從銀蓮花屬植物中得到；除化合物9和12外其余25個化合物均為首次從該植物中分離得到。
　　(3)所鑒定的11個皂苷類成分曾多次在本屬植物中分離得到，在化學(xué)分類學(xué)方面對該植物具有一定價值。除皂苷9和12外，其余9個皂苷均為首次從該植物中發(fā)現(xiàn)，提示不同產(chǎn)地的植物

15、可能存在成分的差異，并為該植物皂苷成分的種類積累了新的資料。
　　(4)首次從銀蓮花屬植物中發(fā)現(xiàn)一系列新木脂素苷類及簡單苯丙素類化合物并確定了它們的絕對構(gòu)型，為銀蓮花屬植物的化學(xué)組成提供了新的資料，進一步揭示了不同產(chǎn)地植物成分的差異性，并具有重要的化學(xué)分類學(xué)意義。
　　(5)通過體外抗腫瘤活性篩選，初步探討了木脂素苷和皂苷類成分的構(gòu)效關(guān)系。
　　(6)本課題拓展了打破碗花花的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為合理利用陜西產(chǎn)地的藥用資源提