靈壽金銀花花期化控調(diào)節(jié)、活性成分檢測及其品質(zhì)比較的研究.pdf

1、本研究利用植物生長調(diào)節(jié)劑(赤霉素、烯效唑)對靈壽金銀花花期進(jìn)行化學(xué)調(diào)控，通過對不同施用濃度及施用次數(shù)的考察，以花期、相關(guān)形態(tài)指標(biāo)及其主要活性成分含量為依據(jù)，選擇一種較適宜的田間化控操作方法，為科學(xué)、合理栽培金銀花提供一定的理論指導(dǎo)。
　　此外，本研究還將靈壽金銀花與不同市售品種的金銀花(產(chǎn)地分別為河南、山東、安徽、河北巨鹿)進(jìn)行活性成分含量的比較，并對靈壽忍冬植株不同部位以及不同采集時(shí)間的樣品中活性成分含量進(jìn)行研究，為靈壽金銀花品

2、質(zhì)評價(jià)以及資源綜合開發(fā)提供一定的理論依據(jù)。
　　1金銀花中主要活性成分含量測定的方法學(xué)研究
　　1.1金銀花中綠原酸及木犀草苷含量測定的方法學(xué)研究
　　參考2010年版中國藥典，采用高效液相色譜法對金銀花中綠原酸及木犀草苷含量進(jìn)行測定并開展方法學(xué)的優(yōu)化研究。結(jié)果表明，綠原酸濃度在13.84～147.6μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，回歸方程為y=35.1x-85.6，r=0.9999；木犀草苷濃度在14.93～

3、159.2μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，回歸方程為y=27.2x-36.5，r=1.0000。綠原酸及木犀草苷檢測限分別為13.8×10-6、56.0×10-6mg/mL，定量限分別為46.1×10-6、187×10-6mg/mL，精密度實(shí)驗(yàn)RSD值分別為2.2％和2.6％，重復(fù)性實(shí)驗(yàn)RSD值分別為2.3％和1.3％，穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)RSD值分別為1.7％和1.9％，綠原酸及木犀草苷平均回收率分別為99.4％和98.1％，RSD值分

4、別為1.8％和1.5％。該方法準(zhǔn)確可靠、簡便易行、重復(fù)性良好，可用于金銀花樣品中綠原酸及木犀草苷含量的測定。
　　1.2金銀花中總黃酮含量測定的方法學(xué)研究
　　以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法顯色，紫外可見分光光度法對金銀花中總黃酮含量進(jìn)行測定。結(jié)果表明，蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液在10.82～54.10μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度值呈良好線性關(guān)系，回歸方程為y=11.48×-0.0051，r=0.9999。

5、精密度實(shí)驗(yàn)、重復(fù)性實(shí)驗(yàn)、顯色化合物及樣品穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)RSD值分別為1.6％、2.6％、1.0％、1.3％。總黃酮平均回收率為99.7％，RSD值為1.5％。該方法具有準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性良好等特點(diǎn)，可用于金銀花樣品中總黃酮的含量測定。
　　1.3金銀花中金屬元素(Cu、Fe、Zn、Mg、Ca)含量測定方法學(xué)研究
　　利用HNO3-HClO4濕法消解處理樣品，火焰原子吸收光譜法對金銀花中金屬元素(Cu、zn、Fe、Mg、Ca)含量進(jìn)

6、行測定。實(shí)驗(yàn)表明，Cu、Zn、Fe、Mg、Ca元素分別在0.375～6.00μg/mL、0.200～1.60μg/mL、2.00～10.0μg/mL、0.0500～0.600μg/mL和1.25～15.0μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度值呈良好線性關(guān)系，回歸方程分別為Cu：y=0.0386x-0.0026，r=1.0000；Zn：v=0.2913x-0.0084，r=0.9998；Fe：y=0.0469x+0.0179，r=0.9996；M

7、g：v=0.5563x+0.0026，r=0.9995；Ca：y=0.0236x+0.0044，r=0.9998。Cu、Zn、Fe、Mg、Ca元素精密度實(shí)驗(yàn)RSD值分別為0.9％、0.9％、1.7％、0.9％、1.0％，重復(fù)性實(shí)驗(yàn)RSD值分別為2.9％、1.2％、1.7％、1.5％、2.9％，穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)RSD值分別為0.7％、1.4％、1.3％、1.4％、1.5％，平均回收率分別為97.5％、101.8％、98.4％、100.9％、10

8、1.2％，RSD值分別為2.9％、2.6％、2.3％、2.8％、1.8％。該方法準(zhǔn)確、可靠、簡便，可用于金銀花樣品中多種金屬元素含量的檢測。
　　2靈壽金銀花花期化學(xué)調(diào)控研究
　　本實(shí)驗(yàn)采用兩種植物生長調(diào)節(jié)劑——赤霉素(GA3)和烯效唑(S-3307)處理田間生長的金銀花植株，考察不同施藥濃度及施藥次數(shù)對金銀花蕾期形態(tài)指標(biāo)及活性成分含量的影響。研究表明，赤霉素對金銀花花蕾發(fā)育具有一定程度的促進(jìn)作用，而烯效唑則有一定的延緩作用

9、，施用兩種調(diào)節(jié)劑后可使金銀花整個(gè)采收期延長5～6天。赤霉素處理對金銀花花蕾長度、百蕾鮮重及干重?zé)o顯著影響，與對照組相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；對木犀草苷及總黃酮含量也無顯著影響，但對綠原酸含量有顯著性提高，其中以噴施濃度為1000 mg/L、連續(xù)噴施3次效果較好，綠原酸含量可提高到2.77％，是對照組含量的1.2倍。與對照組相比，低濃度(150 mg/L)僅噴施一次烯效唑處理組中金銀花形態(tài)指標(biāo)及主要活性成分含量略低于對照組，但并未造成明顯的抑制

10、作用。
　　3靈壽金銀花與市售品種中主要活性成分含量的比較研究
　　以綠原酸、木犀草苷、總黃酮及金屬元素含量為評價(jià)指標(biāo)對靈壽金銀花與市售品種進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，與不同產(chǎn)地(河南、山東、河北巨鹿、安徽)的市售金銀花品種相比，靈壽金銀花中綠原酸及總黃酮含量較高，分別為4.03％和4.27％；木犀草苷含量為0.120％，高于一些市售品種，如產(chǎn)地為山東、河北巨鹿和安徽的金銀花。金屬元素中Zn、Fe元素含量也以靈壽金銀花較高，分別為3

11、1.15、507.9μg/g，但Cu、Mg、Ca元素含量較低。
　　4忍冬植株不同部位以及不同采集時(shí)間的樣品中主要活性成分含量的比較研究
　　忍冬植株因部位不同，樣品中活性成分含量也有所差別。研究表明，綠原酸含量由高到低依次為花蕾>葉>藤，木犀草苷含量為葉>藤>花蕾，總黃酮含量為葉>花蕾>藤，金屬元素中Cu、Zn元素含量在花蕾中較高，但Fe、Mg、Ca元素含量均以葉中含量較高。
　　由于采集時(shí)間不同，樣品中活性成分含量