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文檔簡介
1、目的:探討催乳素(Prolactin,PRL)/催乳素受體(PRLr)途徑與免疫細胞活化有關(guān)的協(xié)同刺激信號間的關(guān)系,及對Th1/Th2細胞因子分泌失衡的影響,以期發(fā)現(xiàn):PRL/PRLr在免疫調(diào)節(jié)方面的作用機制。 方法:1.以具備同時表達。PRLr及CDl54的人T淋巴細胞白血病細胞株Jurkat D1.1為實驗對象,將JurkatDl.1細胞隨機分為4組,用重組人催乳素(rhPRL)及植物血凝素(PHA)共同刺激JurkatDl
2、.1細胞,預(yù)先加或不加鼠抗人催乳素受體抗體,流式細胞儀檢測JurkatDl.1細胞表面抗原CDl54的表達。免疫組化法再次證實以上結(jié)果。2.分別用不同濃度rhPRL及PHA共同刺激JurkatDl.1細胞,預(yù)先加入或不加入鼠抗人催乳素受體抗體,培養(yǎng)24小時后,收集上清,ELISA檢測白細胞介素-4(IL-4)、γ-干擾素(IFN-γ)濃度。3.采用免疫組化方法檢測28例系統(tǒng)性硬皮病(Systemic sclerosis,SSc)患者和正
3、常人皮膚組織中PRL、PRLr、IFN-γ、IL-4,并分析上述指標間的相關(guān)性。 結(jié)果:1.在rhPRL和PHA共同作用下,Jurkat細胞CD154表達量(20.8±7.0)%較空白對照組(2.6±0.5)%明顯增加(t=8.84,P<0.001)。預(yù)先加入鼠抗人催乳素受體抗體后再加入rhPRL和PHA,CD154的表達量(2.6±0.6)%無明顯升高(t=0.04,P>0,05)。2.PRL對Jurkat細胞IL-4的分泌無
4、明顯影響(P>0.05)。隨著rhPRL刺激濃度的增加,Jurkat細胞IFN-γ分泌量逐漸增加,呈劑量依賴性,各組差異有顯著性(P<0.05)。預(yù)先加入鼠抗人催乳素受體抗體,Jurkat細胞IFN-γ分泌量無明顯變化(P>0.05)。3.PRL、PRLr表達于皮膚角質(zhì)形成細胞,汗管內(nèi)皮及淺層細胞、血管內(nèi)皮細胞。SSc組PRL的表達高于正常對照組(P<0.001),PRLr的表達在兩組間無差別(P>0.5)。IFN-γ、IL-4見于皮膚
5、角質(zhì)形成細胞、血管內(nèi)皮細胞、浸潤的淋巴細胞。SSc組IL-4的表達高于正常對照組(P<0.001),IFN-γ在兩組間的表達無差別(P>0.1)。SSc組中PRL與IL-4的表達正相關(guān)(r<,s>=0.893,P<0.001)。 結(jié)論:1.PRL可能是通過刺激T細胞CD154的表達、參與Th1/Th2細胞因子分泌的失衡而調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。這些作用是通過PRL/PRLr途徑介導(dǎo)的。2.SSc患者皮損表達PRL及PRLr,皮損局部存在T
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