TNFα308G-A基因多態(tài)性與食管鱗狀細胞癌預后關系的研究.pdf

1、目的:食管癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一,其病因和發(fā)病機制尚未完全闡明。在我國食管癌發(fā)病率高、預后不佳,五年生存率僅35％左右。影響食管癌預后的因素很多,除了腫瘤分級、臨床分期、淋巴結轉移情況等,機體的免疫狀態(tài)、遺傳易感性日益受到重視。
　　 腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)是一種具有多種生物活性的致炎細胞因子,由激活的單核/巨噬細胞產生。該基因啟動子區(qū)域轉錄起始位點上游第308

2、位點存在G/A等位基因多態(tài)性,研究表明,TNFα308G/A基因多態(tài)性可以通過影響TNFα轉錄水平使血清TNFα高表達從而增加多種腫瘤的易感性,并導致患者預后不良。有關TNFα308G/A多態(tài)性與食管癌發(fā)病風險的關系國內外已有報道,但結論不一,而該基因多態(tài)性位點與食管癌預后是否相關也尚無定論,我們針對中國人群的遺傳背景,研究河北漢族人群TNFα308G/A基因多態(tài)性分布情況,探討其與食管鱗狀細胞癌(esophageal squamous

3、 cell carcinoma,ESCC)臨床病理指標及預后的相關性,為食管癌的防治和預后評價提供遺傳學理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1材料:ESCC120例,選自河北醫(yī)科大學第四臨床病理科2004年1月～2005年12月間住院手術切除的原發(fā)性食管癌福爾馬林固定石蠟包埋組織,所有病例經病理證實為鱗狀細胞癌,術前均未接受過任何治療,并有完整的臨床隨訪資料。對照組95例選自同一時期電子內鏡室咬檢的非癌癥病人的食管福爾馬林固

4、定石蠟包埋組織。
　　 2福爾馬林固定石蠟包埋組織DNA的提取采用傳統(tǒng)二甲苯脫蠟,蛋白酶K消化-酚氯仿抽提法提取基因組DNA。
　　 3 PCR-SSP分析:應用等位基因特異性聚合酶鏈反應(PCR-SSP)技術擴增目的基因,檢測食管癌組和對照組的TNFα308G/A基因多態(tài)性的基因型分布及等位基因頻率分布情況。x2檢驗及Fisher's確切概率法比較兩組分布頻率的差別,并確定其相對危險度OR值及OR95％CI；COX回歸

5、模型對有隨訪資料的120例ESCC患者進行多因素生存分析；Kaplan-Meier生存曲線進行單因素生存分析,Log-Rank法比較G、A基因型攜帶者5年生存期的差別。運用統(tǒng)計軟件SPSS13.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果:
　　 1 ESCC患者組與非癌癥對照組TNFα308G/A基因型和等位基因頻率的分布經Hardy-Weinberg平衡分析,具有群體代表性。TNFα308GG、GA、AA基因型在ESCC患者

6、組分布頻率分別為82.5％、15.83％、1.67％；在非癌癥對照組,則分別為86.32％、12.63％、1.05％。ESCC患者組與對照組相比基因型分布頻率無顯著差異(x2=0.58,P=0.446)?；蛐皖l率的相對風險分析發(fā)現(xiàn),AA+GA基因型ESCC患者的發(fā)病風險是GG基因型的1.338倍,95％CI=0.631～2.836,結果無統(tǒng)計學意義。
　　 ESCC患者組G、A等位基因頻率分別為90.42％和9.58％,對照組

7、分別為92.63％和7.37％,兩組比較差異無顯著性。與G等位基因相比,A等位基因增大食管癌的發(fā)病風險(OR=1.332,95％CI=0.667～2.667),但差異無明顯統(tǒng)計學意義。
　　 2 TNFα308G/A基因型與ESCC患者臨床病理特征的關系比較顯示,GA+AA基因型在高～中分化組中的比例為14.29％(15/105)；在低分化組比例為40.00％(6/15),GA+AA基因型在低分化個體中所占比例高于高中分化組,兩

8、組比較有顯著統(tǒng)計學差異(P<0.05)。GA+AA等位基因型臨床分期較晚(Ⅲ期+Ⅳ期)的患者中分布比例明顯高于臨床分期早(0～Ⅰ期+Ⅱ期)的患者,分別為10.84％(9/83)和32.43％(12/37),二者相比具有顯著統(tǒng)計學差異性(P<0.05)。不同基因型與患者年齡、性別、腫瘤部位、浸潤深度、有無淋巴結轉移等臨床病理參數(shù)未見明顯相關性P均>0.05。
　　 3 Kaplan-Meier法單因素生存分析結果表明,腫瘤組織分化

9、、浸潤深度、淋巴結轉移、臨床分期和TNFα308G/A基因型是影響ESCC預后的相關因素(P<0.01)。而患者的性別、年齡與預后無關(P>0.05)。A等位基因攜帶者與G等位基因攜帶者相比,5年生存率明顯低(P=0.000<0.05),有顯著統(tǒng)計學差異。
　　 4 COX模型多因素分析性別、年齡、浸潤深度、組織分化程度、臨床分期、淋巴結轉移和TNFα308基因型與ESCC患者預后的關系,結果表明腫瘤的組織分化、浸潤深度、臨床分

10、期、TNFα308基因型對預后有顯著影響(P<0.05)。這一結果與Kaplan-Meier單因素生存分析結果基本一致。
　　 結論:
　　 1在研究所涉及的人群中,TNFα308G/A基因多態(tài)性的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。TNFα308G/A基因多態(tài)性基因型在河北地區(qū)漢族人群中的分布基本一致,TNFα308G/A基因多態(tài)性可能與ESCC的發(fā)生無關聯(lián)。
　　 2 TNFα308G/A GA+A