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文檔簡介
1、目的:體外建立穩(wěn)定的三維皮膚(即全層皮膚)創(chuàng)面模型;聯(lián)合多學(xué)科的技術(shù)與方法證明創(chuàng)面收集液對(duì)表皮干細(xì)胞的增殖和分化有促進(jìn)作用。
方法:通過組織工程學(xué)手段建立三維皮膚等價(jià)物的凍傷模型,以收集的成年Wistar大鼠背部全層皮膚創(chuàng)面滲出液為刺激因子,選擇1、3、7、14、21天時(shí)相收集標(biāo)本,進(jìn)行β1整合素、α6整合素、K19抗體的免疫組化染色,觀察并分析抗體表達(dá)陽性細(xì)胞的分布情況及表達(dá)強(qiáng)度。
結(jié)果:(1)通過組織工程
2、學(xué)手段,以表皮干細(xì)胞為種子細(xì)胞,成纖維細(xì)胞-鼠尾膠原凝膠為真皮替代物,模擬在體的培養(yǎng)條件,實(shí)現(xiàn)了穩(wěn)定的三維皮膚創(chuàng)面模型的建立。(2)無創(chuàng)面組、創(chuàng)面收集液+創(chuàng)面組、創(chuàng)面組的特異性抗體免疫組化圖像比對(duì)顯示,皮膚創(chuàng)面的愈合過程中,創(chuàng)緣附近出現(xiàn)了散在的抗體染色陽性細(xì)胞,尤集中于鄰近創(chuàng)面區(qū)。(3)無創(chuàng)面組抗體染色陽性細(xì)胞的分布與數(shù)量在不同時(shí)相區(qū)別不大,差異無顯著性(P>0.05);凍傷后,以創(chuàng)面收集液為刺激因子的實(shí)驗(yàn)組和無創(chuàng)面收集液干預(yù)組之間對(duì)比
3、,在傷后1天,抗體表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)量相當(dāng),差異無顯著性(P>0.05);凍傷后3天、7天、14天、21天不同時(shí)相的免疫組化結(jié)果比對(duì),刺激因子干預(yù)組的表皮干細(xì)胞的特異性抗體陽性表達(dá)均要強(qiáng)于非干預(yù)組,差異有顯著性(P<0.01)。
結(jié)論:離體三維皮膚創(chuàng)面愈合過程中表皮干細(xì)胞有異位現(xiàn)象;全層皮膚創(chuàng)面收集液在創(chuàng)面愈合過程中,對(duì)表皮干細(xì)胞的增殖和分化有促進(jìn)作用;本研究結(jié)果將令人們深刻認(rèn)識(shí)創(chuàng)面愈合的機(jī)制與特性,為加速創(chuàng)面愈合及研發(fā)理想的
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