坡壘酚甲在AD小鼠模型中對Aβ誘導的線粒體功能障礙的抑制作用及機制探討.pdf

1、背景與目的：淀粉樣β蛋白(Aβ)與淀粉樣β蛋白結合乙醇脫氫酶(ABAD)結合誘導線粒體功能障礙產(chǎn)生氧化應激是阿爾茨海默病(AD)發(fā)病的主要機制之一。坡壘酚甲(Hopeahainol A)是從我國海南特有植物坡壘樹(拉丁學名：Hopea hainanensis)中分離純化的一種天然多酚類化合物。前期試驗表明坡壘酚甲在AD模型中具有強抗氧化作用和腦保護作用。因此，我們擬在探索坡壘酚甲是否通過抑制Ap與ABAD結合從而抑制Aβ誘導的線粒體功能

2、障礙，減少氧化應激，最終治療AD。
　　 方法：本研究分為體內(nèi)研究和體外研究兩部分。體內(nèi)研究采用雙轉(zhuǎn)基因APP/PS1小鼠(8個月)，體外研究對象為Aβ1-42處理原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)元(24小時)，然后采用坡壘酚甲干預。1)在體內(nèi)外用分光光度計法檢測坡壘酚甲處理前后線粒體復合物IV、ABAD和Caspase3活性，并采用Western blot檢測細胞色素C的釋放情況。2)采用免疫共沉淀法和免疫熒光顯微鏡檢測坡壘酚甲處理前后Aβ1

3、-42處理原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)元中Aβ1-42與ABAD結合和共表達分布情況變化。3)采用高效液相法測量坡壘酚甲在加入Aβ1-42前后含量變化從而檢測坡壘酚甲與Aβ1-42的結合情況并采用計算機模擬計算二者結合位點。
　　 結果：1)坡壘酚甲能有效抑制Aβ誘導的線粒體功能障礙。2)坡壘酚甲能抑制Aβ與ABAD結合。3)坡壘酚甲通過與AβC端丙氨酸(Ala42)形成氫鍵從而競爭性抑制Aβ與ABAD結合。
　　 結論：坡壘酚甲可