甲磺酸普立地諾注射液的臨床前研究.pdf

1、甲磺酸普立地諾(pridinol mesylate)是一種中樞性抗膽堿藥[1]，通過(guò)拮抗M型受體（主要為M1和M4受體亞型），具有抗乙酰膽堿的作用，能夠改善帕金森患者的運(yùn)動(dòng)障礙癥狀，延遲患者的致殘時(shí)間，減輕患者的痛苦。其次普立地諾對(duì)肌肉痙攣有明顯的松弛效應(yīng)，主要作用于大腦皮層和腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，對(duì)脊柱運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的反射活動(dòng)產(chǎn)生抑制作用[2]，是一種中樞性骨骼肌松弛藥，臨床應(yīng)用于肌肉痙攣及伴有疼痛或收縮的運(yùn)動(dòng)障礙性疾病[3]。
　　甲磺酸

2、普立地諾收載于《日本藥局方外》2002年版，《中國(guó)藥典》尚未見(jiàn)其收載，中國(guó)對(duì)其相關(guān)報(bào)道較少亦無(wú)相關(guān)產(chǎn)品上市，僅見(jiàn)本課題組申請(qǐng)的發(fā)明專利[4]。依據(jù)中國(guó)《藥品注冊(cè)管理辦法》中“化學(xué)藥品注冊(cè)分類”要求，本文對(duì)所研制的甲磺酸普立地諾注射液進(jìn)行了臨床前的部分研究，旨在為該注射液的注冊(cè)積累資料。
　　1.處方工藝研究。通過(guò)對(duì)甲磺酸普立地諾基本理化性質(zhì)的考察，篩選注射液的最佳pH值范圍和pH緩沖劑種類及其用量，確定甲磺酸普立地諾注射液最優(yōu)處方

3、:0.2％甲磺酸普立地諾、1.0％?；撬帷?.1％焦亞硫酸鈉、0.7％氯化鈉、0.4％氫氧化鈉溶液適量調(diào)節(jié)pH值至6.5-7.5。在處方中?；撬釣閜H緩沖劑，焦亞硫酸鈉為抗氧劑，氯化鈉為等滲調(diào)節(jié)劑，氫氧化鈉為pH調(diào)節(jié)劑。用此處方并按常規(guī)制備工藝所制備的甲磺酸普立地諾注射液澄明、穩(wěn)定，滲透壓合格，pH適宜，含量準(zhǔn)確。甲磺酸普立地諾注射液的規(guī)格為1mL(:)2mg。
　　2.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。對(duì)甲磺酸普立地諾注射液進(jìn)行了鑒別、檢查和含量測(cè)

4、定等研究。結(jié)果，鑒別項(xiàng)目均為陽(yáng)性;檢查項(xiàng)目符合《中國(guó)藥典》注射液項(xiàng)下相關(guān)要求;采用反相HPLC法測(cè)定甲磺酸普立地諾注射液的含量，其色譜有條件為:色譜柱為Ultimate XB C18柱，以甲醇∶0.1％磷酸(7∶3，v/v)其中含4mmol/L辛烷磺酸鈉為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)215nm，流速為1.0mL/min，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為20μL。
　　3.穩(wěn)定性研究。影響因素試驗(yàn)，包括高溫試驗(yàn)（60℃溫度下放置10天），強(qiáng)光照試驗(yàn)(45

5、00±500Lx放置10天);加速試驗(yàn)（溫度為40℃±2℃、相對(duì)濕度為75％±5％的條件下放置6個(gè)月，儀器的溫度控制在±2℃，濕度控制在±5％）;長(zhǎng)期試驗(yàn)（溫度為25℃±2℃、相對(duì)濕度為60％±5％的條件下放置12個(gè)月，儀器的溫度控制在±2℃，濕度控制在±5％）。結(jié)果:在影響因素和加速試驗(yàn)中，甲磺酸普立地諾注射液的性狀、澄明度、含量、pH值等指標(biāo)未見(jiàn)明顯變化;目前長(zhǎng)期試驗(yàn)考察至12個(gè)月，各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)明顯變化，但長(zhǎng)期試驗(yàn)有待繼續(xù)考察至36個(gè)

6、月。
　　4.一般藥理學(xué)研究。考察了高、中、低3個(gè)不同劑量的甲磺酸普立地諾注射液對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響。結(jié)果，該藥對(duì)KM小鼠的一般行為和協(xié)調(diào)功能與對(duì)照組相比無(wú)明顯改變;對(duì)閾下劑量戊巴比妥鈉的催眠作用亦無(wú)協(xié)同作用;該藥對(duì)SD大鼠的血壓、心電圖、心率和呼吸頻率亦無(wú)明顯影響。
　　5.安全性評(píng)價(jià)。采用改良寇氏法測(cè)定甲磺酸普立地諾注射液的LD50，常規(guī)法測(cè)定該藥對(duì)新西蘭兔的溶血性、肌肉和血管刺激性。結(jié)果，

7、甲磺酸普立地諾注射液LD50=82.05mg/kg，95％可信范圍為72.49mg/kg-92.83mg/kg，其LD50是正常人口服給藥劑量的1025.5倍，說(shuō)明甲磺酸普立地諾注射液安全性高。甲磺酸普立地諾注射液對(duì)新西蘭兔無(wú)明顯的溶血性、肌肉和血管刺激性，說(shuō)明該藥可用于肌肉注射給藥，也適用于靜脈注射給藥。
　　6.藥代動(dòng)力學(xué)研究。采用新西蘭兔動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，建立了甲磺酸普立地諾血藥濃度測(cè)定方法。運(yùn)用DAS2.0實(shí)用藥代動(dòng)力學(xué)程序軟件分