Ikaros在腫瘤細(xì)胞凋亡及轉(zhuǎn)移中的作用和機(jī)制研究.pdf

1、轉(zhuǎn)錄因子Ikaros在造血細(xì)胞發(fā)育和分化的過程中發(fā)揮著非常重要的作用。近年來發(fā)現(xiàn)造血系統(tǒng)外的其它組織中也有Ikaros的表達(dá)并可能發(fā)揮著某種功能。本課題分別就(1)Ikaros在白血病細(xì)胞凋亡中的作用和(2)Ikaros在卵巢痛中的作用和機(jī)制進(jìn)行了初步研究。
　　第一部分研究了Ikaros在白血病細(xì)胞凋亡中的作用。我們在研究中發(fā)現(xiàn),化療藥物處理或紫外照射白血病細(xì)胞后Ikaros全長亞型(IK1)蛋白水平發(fā)生下調(diào),它的下調(diào)早于半胱氨

2、酸蛋白酶3(Caspase3)的活化。Etoposide處理細(xì)胞后Ik1蛋白的半衰期顯著縮短,進(jìn)一步的研究結(jié)果表明IK1蛋白的減少是由于蛋白酶體途徑降解加速所致。在NB4細(xì)胞中過表達(dá)IK1可以上調(diào)Caspase9蛋白的表達(dá)并加速etoposide誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的發(fā)生。我們首次發(fā)現(xiàn)化療藥物處理或紫外照射白血病細(xì)胞后IK1蛋白會在凋亡早期通過蛋白酶體途徑發(fā)生降解,并且IK1蛋白能加速細(xì)胞凋亡的發(fā)生。本研究首次揭示了臨床化療藥物和IK1蛋白穩(wěn)

3、定性的關(guān)系。
　　第二部分研究了Ikaros在卵巢癌中的作用和機(jī)制。通過免疫組化分析,我們首次發(fā)現(xiàn)IK1蛋白在人卵巢痛組織中高表達(dá)且其表達(dá)量與卵巢漿液性腺痛的臨床分期和病理分級密切相關(guān)。接下來我們進(jìn)一步探索了IK1蛋白在卵巢中的功能。在卵巢癌細(xì)胞中過表達(dá)IK1后發(fā)現(xiàn)其可通過誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生G1期阻滯而發(fā)揮抑制細(xì)胞增殖的作用,伴隨著P27、P21蛋白的上調(diào)和Cyclin D1、Cyclin D2蛋白的下調(diào)。同時(shí),通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及tra

4、nswell實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞的遷移和侵襲能力顯著增加。過表達(dá)IK1之后Slug的mRNA水平顯著上調(diào),與遷移侵襲相關(guān)的Slug的兩個靶基因E-cadherin和MMP-2也分別發(fā)生了下調(diào)和上調(diào),而且干擾Slug的表達(dá)可以消除IK1所介導(dǎo)的遷移侵襲能力的增加。以上研究結(jié)果表明Slug在這個過程中發(fā)揮著重要作用。總之,我們首次證明了IK1在卵巢癌的發(fā)展過程中發(fā)揮了雙重作用,即抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞遷移侵襲,后者主要是通過IK1對Slug的