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文檔簡介
1、目的:檢測暴露于不同濃度汞蒸汽后大鼠晶狀體中熱休克蛋白70(HSP70)、金屬硫蛋白(MT-Ⅱ)表達含量的變化,探討其在汞中毒性白內障形成中的作用和意義。
方法:選用體重約350g-400g的成年雄性SD大鼠56只隨機分為三組,低濃度組(24只)、高濃度組(24只)和對照組(8只)。將實驗組大鼠在玻璃箱中進行靜式吸入染毒,每日30分鐘,每周6天。低濃度組吸入汞蒸汽最高濃度為0.01mg/m3,高濃度組吸入汞蒸汽濃度為3 m
2、g/m3以上。正常對照組不予任何處理,檢查晶狀體透明后即取材。在第一次染毒后第1周末、第2周末、第3周末和第4周末分別取材12鼠(低濃度組6只、高濃度組6只)。全身麻醉后取一只眼球分離晶狀體置液氮中用于做Western Blotting檢測HSP70和MT-Ⅱ的表達;將大鼠全身用4%多聚甲醛溶液灌注固定后取另一眼球用于做免疫組化檢測HSP70、MT-Ⅱ的表達。
結果:⑴不同時期裂隙燈下觀察晶狀體渾濁度:對照組晶體透明無變化
3、;低濃度染毒組第3周出現部分大鼠晶體前囊少量點狀混濁,第4周出現晶體前囊點狀混濁;高濃度染毒組第3周出現前囊淺灰色點狀混濁,第4周出現前囊點狀混濁伴皮質輕度混濁。⑵免疫組化檢測和Western Blotting檢測提示HSP70在對照組中和實驗組中的晶狀體上皮細胞表達有顯著性差異,低濃度組與高濃度組表達有差異,與濃度及時間均有相關;MT-Ⅱ在對照組和實驗組的表達有差異,與時間相關,隨時間延長依次遞增,與濃度無明顯相關;HSP70與MT-
4、Ⅱ在晶體上皮細胞中的表達存在正相關性。
結論:熱休克蛋白HSP70與金屬硫蛋白MT-Ⅱ在汞中毒性白內障晶體上皮細胞中均有陽性表達,HSP70的表達水平與汞中毒的濃度和作用時間有明顯的相關性,MT-Ⅱ的表達水平與汞中毒的時間有相關性與汞中毒的濃度無明顯相關性,HSP70與MT-Ⅱ在汞中毒性白內障發(fā)展過程中兩者的表達水平之間存在正相關性,提示HSP70與MT-Ⅱ在汞中毒性白內障的發(fā)生發(fā)展過程中均有一定的保護作用,HSP70與M
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