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1、分類號(hào)jR772∞c袒萄密級(jí):內(nèi)部學(xué)校代碼:11906專量天季樽士學(xué)位論文脂質(zhì)體介導(dǎo)重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長抑制因子基因轉(zhuǎn)染抑制角膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究糍等教坪學(xué)辮專鵬摩稚鹼交提襲瓣期鹼支答辯瓣渤參辯委員念童席王冰王傳氣教授眼科學(xué)20063152006526李鏡海教授結(jié)果:1通過計(jì)算機(jī)自動(dòng)測(cè)序和Westernblotting檢測(cè)f的蛋向表達(dá)證實(shí)成功構(gòu)建真飲表達(dá)的重組人VEGIl51基因;2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果:21光鏡下觀察細(xì)胞生長情況:實(shí)驗(yàn)組貼壁
2、的CRL2480細(xì)胞在加入陽離子脂質(zhì)體與重組人VEGIl51的混合液后繼續(xù)培養(yǎng)未見細(xì)胞數(shù)量增多并可見許多細(xì)胞固縮、斷裂或空泡形成,對(duì)照組貼壁的CRL2480細(xì)胞大量增殖,鋪滿瓶底,細(xì)胞形念典型;22細(xì)胞增硝活性的檢測(cè):MTT法可以看出VEGi轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的吸光度(oD)值拒備時(shí)柏均明顯小于其它三組,而空白載體對(duì)照組、陽離了脂質(zhì)體對(duì)照組及空白對(duì)照組之組『自J比較無差異性。VEGIl51轉(zhuǎn)染組對(duì)體外培養(yǎng)的CRL2480細(xì)胞增蛾缺自明“抑制作用
3、,VEGI的抑制率達(dá)412%。3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果31VEGI轉(zhuǎn)染組(A)中新生血管的平均:=:觀時(shí)fJ為63天空白載體對(duì)照組(B)為31天,陽離予脂質(zhì)體對(duì)照組(C)為32火宅fJ對(duì)照組(D)為32火。A組與B、C、D各組比較差別有顯著性(PO05)。32轉(zhuǎn)染后各時(shí)相角膜新生血管及面積可見A組與B、C、D各組比較差別有顯著意義(P005)33組織切片光鏡下見A組角膜上皮完整,角膜水腫角膜基質(zhì)中有炎性細(xì)胞浸澗和新塵血管隨時(shí)間推移炎癥細(xì)胞和新生m
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