硫氧還蛋白系統(tǒng)在衰老大鼠心肌缺血-再灌注損傷中的作用.pdf

1、目的： 1.觀察衰老心臟心肌組織中硫氧還蛋白系統(tǒng)的功能及蛋白表達(dá)，及其在缺血/再灌注過(guò)程中的改變； 2.探討硫氧還蛋白系統(tǒng)硝基化修飾與衰老心臟及其缺血/再灌注后心功能之間的關(guān)系。 方法：本研究選取成年(4-6月齡)及衰老(22-24月齡)的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為6組：正常成年組、正常衰老組、成年偽手術(shù)組、衰老偽手術(shù)組、成年缺血/再灌注組和衰老缺血/再灌注組。即，缺血/再灌注組均結(jié)扎大鼠左冠狀動(dòng)脈前降支缺血30分鐘

2、，再灌注3小時(shí)；偽手術(shù)組不結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支，其余操作同手術(shù)組。由于左室舒張功能指數(shù)與年齡有顯著的相關(guān)性，左室舒張壓(LeR Ventricle Diastolic Pressure，LNDP)能較好的反映衰老心臟左室舒張期的充盈程度及心功能的狀態(tài)，因此本研究同時(shí)在體監(jiān)測(cè)各組LVDP的變化。 以脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法和特異性較強(qiáng)的半胱氨酸蛋白酶-3活性測(cè)定法檢測(cè)心肌細(xì)胞的凋亡程度，以胰島素還原法測(cè)定心肌組

3、織中Trx活性，以特異性較強(qiáng)的硫氧還蛋白還原酶活性測(cè)定法測(cè)定心肌組織的TR活性，以Western Blot測(cè)定Trx、TR、硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶以及硝基化硫氧還蛋白、硝基化硫氧還蛋白還原酶、硝基化硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶的表達(dá)。 結(jié)論： l.衰老大鼠心肌組織Trx系統(tǒng)活性及表達(dá)降低，心肌缺血/再灌注后，Trx系統(tǒng)活性進(jìn)一步降低，提示衰老心臟心功能降低以及對(duì)缺血/再灌注損傷敏感性升高可能與對(duì)心肌具有保護(hù)作用的Trx系統(tǒng)活性降低

4、有一定的關(guān)聯(lián)。 2.心肌缺血/再灌注后，成年及衰老組大鼠的LVDP均與Trx的活性呈負(fù)相關(guān)，提示衰老大鼠心臟對(duì)缺血/再灌注損傷敏感性升高與Trx系統(tǒng)活性的降低密切相關(guān)。 3.衰老大鼠心肌組織中Trx系統(tǒng)的硝基化程度增高，心肌缺血/再灌注后，Trx系統(tǒng)的硝基化程度進(jìn)一步增高，提示衰老大鼠心肌缺血/再灌注后Trx系統(tǒng)活性及表達(dá)的降低，對(duì)心臟保護(hù)作用的減弱，可能與其硝基化程度的增高有關(guān)。 4.缺血/再灌注后，成年及衰老