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1、研究背景:中期因子是一種新的肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子,是1988年Kadomatsu等運(yùn)用差異雜交的方法從視黃酸誘導(dǎo)的小鼠胚胎腫瘤細(xì)胞系HM1中篩選出的一種新基因,定位于人類11p11.2,長(zhǎng)2kb,相對(duì)分子量為13240道爾頓。成熟人中期因子蛋白由121個(gè)氨基酸殘基組成,其分子中含有23個(gè)賴氨酸殘基和7個(gè)精氨酸殘基,是一堿性氨基酸。中期因子在物種間保持高度保守,人、牛、鼠、非洲爪蛙中期因子的氨基酸序列具有高度同源性。生理情況下,中期因子表達(dá)隨
2、個(gè)體發(fā)育而變化,在胚胎期高表達(dá),參與器官發(fā)生,出生后逐漸降低,在成年組織中,除腎、小腸上皮和大腦皮層少量表達(dá)外,其他部位幾乎不表達(dá)。人們將這一新基因命名為midkine,是妊娠中期(midgestation)和腎臟(kidney)的縮寫。病理情況下,中期因子在腫瘤組織中表達(dá)明顯高于非腫瘤組織,是一種新的生長(zhǎng)和分化因子,參與調(diào)節(jié)惡性腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化,及腫瘤血管發(fā)生、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移,并具有增強(qiáng)纖維蛋白融解、抗腫瘤細(xì)胞調(diào)亡、促有絲分裂及趨
3、化作用。最新研究證明,中期因子在許多惡性腫瘤如Wilms’瘤、食管癌、胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、腎癌、膀胱癌、乳腺癌、卵巢癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤及硬脊膜瘤等中高頻率、高強(qiáng)度表達(dá)。然而,中期因子在白血病中的表達(dá)還鮮有報(bào)道。 研究目的:本實(shí)驗(yàn)用熒光定量PCR的方法檢測(cè)中期因子在白血病患者中的表達(dá)情況,研究中期因子與白血病分型、化療效果及臨床指標(biāo)的關(guān)系,以期為白血病早期診斷、療效預(yù)后判斷、監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)、指導(dǎo)治療等提供新手段。
4、研究對(duì)象:病例組為2005年10月至2006年4月中山大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液科門診及住院白血病患者86例,按FAB標(biāo)準(zhǔn)診斷為急性髓性白血病(AML):40例,其中M0/M1:2例,M2:7例,M3::5例,M4:7例,M5::18例,M6:1例,M7:0例;急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL):19例;混合細(xì)胞白血病:1例;慢性粒細(xì)胞性白血病(CML):12例,均為慢性期患者;慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL):6例。慢性粒單核細(xì)胞白血病(CMML):
5、8例。同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組,共20例。 研究方法:1.分別抽取病例組和對(duì)照組的骨髓液約3ml,分離出骨髓單個(gè)核細(xì)胞,采用熒光定量PCR方法檢測(cè)白血病患者中期因子的表達(dá)。 2.比較不同類型白血病患者與正常對(duì)照中期因子表達(dá)的差異及急性白血病患者完全緩解前后、復(fù)發(fā)前后的中期因子表達(dá)的差異。 3.比較中期因子表達(dá)與臨床指標(biāo)的關(guān)系。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理計(jì)算,P<0.05認(rèn)為差別有統(tǒng)
6、計(jì)學(xué)意義。結(jié)果: 1.AML、ALL、CML、CLL、CMML中期因子表達(dá)均明顯高于正常對(duì)照組;在AML與ALL中期因子表達(dá)無(wú)明顯差異;AML各亞型的中期因子表達(dá)無(wú)明顯差異。 2.急性白血病初治組中期因子表達(dá)較完全緩解組明顯升高;急性白血病完全緩解后中期因子表達(dá)水平仍較正常人明顯升高;ALL患者復(fù)發(fā)后中期因子表達(dá)明顯升高;ALL患者原來(lái)完全緩解時(shí)中期因子的表達(dá)水平高者早期復(fù)發(fā)可能性大。 3.初治急性白血病患者,中
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