兔自體靜脈移植修復(fù)淚小管吻合口愈合研究.pdf

1、目的 嚴(yán)重的眼瞼外傷多合并淚小管斷裂，尤其是下淚小管斷裂，如不能手術(shù)吻合和保持通暢，可引起終身溢淚，嚴(yán)重影響患者的工作及生活。淚小管吻合術(shù)是目前治療淚小管斷裂的標(biāo)準(zhǔn)方法。但對(duì)于創(chuàng)傷嚴(yán)重，瘢痕增生明顯，淚小管部分缺損及局部解剖結(jié)構(gòu)破壞的二次手術(shù)病例，則無法直接對(duì)端吻合。上世紀(jì)六十年代起，陸續(xù)有報(bào)道采用自體靜脈移植修復(fù)淚小管，但這些報(bào)道多為臨床應(yīng)用病例分析，未見相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。 本實(shí)驗(yàn)采用剪切方法，建立兔淚小管斷裂模型，使用自

2、體靜脈搭橋移植及直接對(duì)端吻合修復(fù)淚小管斷裂，觀察自體靜脈移植及直接吻合的吻合口局部病理改變。 材料與方法 1 動(dòng)物與分組成年健康日本大耳白兔64只，體重2.0～2.5kg，雌雄兼用，無眼部疾患及頭面部異常。隨機(jī)抽取4只設(shè)為正常對(duì)照組(8眼)，剩余60只兔(120眼)左右眼隨機(jī)分為靜脈移植組及直接吻合對(duì)照組(每組60眼)。 2 手術(shù)方法剪斷或切斷淚小管，建立淚小管斷裂模型。以硅膠管作為支撐，直接吻合組行淚小管兩斷端

3、對(duì)端吻合修復(fù)淚小管斷裂，靜脈移植組采用自體靜脈移植修復(fù)淚小管斷裂，將自體耳緣靜脈兩端與淚小管兩斷端分別吻合。正常對(duì)照組不進(jìn)行手術(shù)處理。 3 觀察項(xiàng)目和時(shí)間點(diǎn)術(shù)后1d、3d、5d、7d、14d及28d，拔除術(shù)中置入硅膠管，行熒光素排泄試驗(yàn)、淚道沖洗試驗(yàn)，觀察并記錄淚道通暢情況。于上述6個(gè)時(shí)間點(diǎn)，行標(biāo)本大體觀察及常規(guī)HE染色(病理組織學(xué)觀察)，觀察淚小管吻合口區(qū)局部的病理改變，免疫組化染色分層計(jì)數(shù)吻合口區(qū)上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞的增殖細(xì)胞核抗原

4、(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)陽(yáng)性率，以觀察吻合口區(qū)細(xì)胞增殖情況。正常對(duì)照組觀察項(xiàng)目同上，數(shù)據(jù)作為正常對(duì)照使用。 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用x±s表示，使用SPSS11．0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。靜脈移植組與直接吻合組比較使用配對(duì)t檢驗(yàn)，靜脈移植組、直接吻合組及正常對(duì)照組比較采用單因素方差分析，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 結(jié)果 1 淚小管斷裂修復(fù)術(shù)后淚道通暢情況靜脈

5、移植組于淚小管修復(fù)術(shù)后第7天，直接吻合組于術(shù)后5天，淚道恢復(fù)導(dǎo)淚功能。靜脈移植組熒光素排泄試驗(yàn)陽(yáng)性時(shí)間，與直接吻合組及正常對(duì)照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2 淚小管斷裂修復(fù)術(shù)后吻合口愈合情況2．1大體觀察結(jié)果術(shù)后1、3天，兩手術(shù)組吻合口有明顯紅腫、滲出物。術(shù)后5天，靜脈移植組仍見吻合口裂隙，直接吻合組吻合口已模糊。術(shù)后7天，兩手術(shù)組吻合口均不明顯。術(shù)后28天，僅能通過縫線判斷吻合口位置。 2．2病理組織學(xué)

6、觀察結(jié)果靜脈移植組：淚小管修復(fù)術(shù)后3天，吻合口處移植血管內(nèi)皮細(xì)胞開始脫落，與此同時(shí)淚小管上皮細(xì)胞向缺損處移行；術(shù)后5天，吻合口處移植血管出現(xiàn)平滑肌細(xì)胞退化及成纖維細(xì)胞增生；術(shù)后7天，吻合口區(qū)由新生淚小管上皮完全覆蓋；術(shù)后28天，上皮層形態(tài)基本穩(wěn)定，但上皮下成纖維細(xì)胞增殖仍較活躍。 直接吻合組：術(shù)后5天吻合口區(qū)淚小管上皮完全覆蓋，14天基本恢復(fù)形態(tài)，術(shù)后28天上皮下可見大量膠原纖維。 2. 3 免疫組化觀察結(jié)果術(shù)后3天，上皮細(xì)胞及

7、成纖維細(xì)胞的PCNA陽(yáng)性率均開始明顯增加。靜脈移植組于淚小管修復(fù)術(shù)后7天，直接吻合組于術(shù)后5天，上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞的PCNA陽(yáng)性率均達(dá)到高峰。以后，上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞的PCNA陽(yáng)性率逐漸下降。 術(shù)后5天，靜脈移植組上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞的PCNA陽(yáng)性率均低于直接吻合組(P<0.01)。術(shù)后28天，靜脈移植組成纖維細(xì)胞的PCNA陽(yáng)性率高于直接吻合組及正常對(duì)照組(P<0.05)。 結(jié)論 1．兔淚小管剪切傷后，直接吻